[发明专利]一种三七含量检测及优化提取纯化方法

说明书

技术领域

本发明属于三七提取的技术领域，尤其涉及一种三七含量检测及优化提取纯化方法。

背景技术

三七[Panax Notoginseng(Burk.)F.H.Chen]为五加科人参属植物，是我国名贵的传统中药材，药用主要取其根，具活血化癖和消肿止痛的功效，目前大多用于冠心病、心绞痛等心血管系统疾病的防治。现代药理研究证明三七总皂苷具有多方面的生物活性，主要表现在扩张冠状动脉、增加冠脉血流量、改善心肌代谢、抗自由基、抗凝、钙拮抗等方面.三七内含多种化学成分，其中三七总皂苷(PNS)是其主要有效成分，含量约占三七块根的10-12％。目前从三七的不同生长部位中分离并鉴定到20种单体皂苷成分，主要成分是三醇皂苷Rg1和二醇皂苷Rb1等。中药制剂中，常用三七提取物(液或浸膏)与其它中药配伍制成各种中药制剂。目前，现有的三七含量检测及优化提取纯化方法复杂、实验时间长、费用高、检测结果不准确，三七提取方法生产成本高、周期长，提取率较低，无法去除糖类等水溶性杂质及大部分脂溶性杂质，易存在重金属污染和有机溶剂毒性残留，提取物的吸潮性和色泽较差，同时纯度较低，质量不稳定。目前，现有的三七含量检测及提取方法复杂，时间长，成本高，检测结果不准确，提取物的质量差，存在重金属污染和有机溶剂毒性残留，纯度和提取率都较低的问题。

发明内容

本发明实施例的目的在于提供一种三七含量检测及优化提取纯化方法，旨在解决传统的三七含量检测及提取方法复杂，时间长，成本高，检测结果不准确，提取物的质量差，存在重金属污染和有机溶剂毒性残留，纯度和提取率都较低的问题。

本发明实施例是这样实现的，一种三七含量检测及优化提取纯化方法，该方法步骤流程包括仪器药品与试剂的准备、标准曲线的制备、进行稳定性试验、进行精密度试验、进行重现性试验、进行回收率试验、计算分析得出结论；

所述的仪器药品与试剂的准备是指选择仪器药品与试剂，采用UV-2201分光光度计、三七总皂苷对照品、三七药材，浓硫酸、乙醇和甲醇均为分析纯；

所述的标准曲线的制备是指精密称取在60℃减压干燥至恒重的三七总皂苷对照品10.2mg，加甲醇稀释至100ml，制成对照品溶液，精密量取0.0，1.0，2.0，3.0，4.0，5.0ml分别置于10ml容量瓶中，挥干溶剂，加人浓硫酸1ml，于80℃恒温水浴中加热反应1h，立即置于冰水中冷却5min，分别加甲醇稀释至10ml刻度，摇匀，放置30min，以试剂空白作对照，按照分光光度法，在276nm波长处测定吸光度(A)，以吸光度为纵坐标，浓度为横坐标，绘制标准曲线，各浓度(C)相应的吸光度(A)经统计处理，求得回归方程为：

A＝0.06531+0.03304C，r＝0.99960；

所述的进行稳定性试验是指精密吸取供试品溶液1.0ml，按照标准曲线制备项下操作，放置0，1，2，3，4，5，6h后测定，结果RSD为2.16％，表明供试品溶液在6h内稳定；

所述的进行精密度试验是指精密吸取三七总皂苷对照品溶液2.0ml，按标准曲线制备项下操作，测定吸光度，重复5次，RSD为0.83％，表明精密度良好；

所述的进行重现性试验是指平行取同一供试品5份，分别按样品测试条件测定，结果RSD为1.78％，重现性符合要求；

所述的进行回收率试验是指取已知含量的样品5份，精密称定，分别加入一定量的三七总皂苷对照品，按照标准曲线制备项下操作，分别测定，结果回收率为100.72％，RSD为2.05％；

对提取效率影响较大的4项因素：乙醇浓度、热浸时间、热浸温度和乙醇用量。所述的计算分析得出结论是指精密量取供试品溶液40密置10ml具塞试管中，于水浴中挥干溶剂，按照标准曲线制备项下方法自“加入浓硫酸1ml”起，依法测定吸光度，并用回归方程计算，对各因素采用正交试验分析，得出结论：各因素对提取效果影响最大的是乙醇浓度，其次为热浸时间和热浸温度，乙醇用量在所考察的范围内影响最小，确定三七最优提取条件为：乙醇浓度80％，浸出时间160min，温度65℃，溶剂量为药材量的12倍。

一种三七优化提取纯化方法，该方法步骤流程包括利用热浸法进行提取、对大孔树脂进行预处理、用大孔树脂进行纯化、用洗脱剂洗脱、蒸馏干燥后成品；

所述的利用热浸法进行提取是指将三七粉碎为20～40目的粗粉，在75％乙醇中浸泡12h，在温度60℃下热浸提3次，每次浸提时间约1h，收集合并滤液，减压浓缩后进行真空干燥；