[发明专利]一种β‑烟酰胺单核苷酸的纯化方法有效
| 申请号： | 201510113667.7 | 申请日： | 2015-03-16 |
| 公开（公告）号： | CN104817604B | 公开（公告）日： | 2017-08-04 |
| 发明（设计）人： | 傅荣昭;戴柱;张琦 | 申请（专利权）人： | 邦泰生物工程(深圳)有限公司 |
| 主分类号： | C07H19/048 | 分类号： | C07H19/048;C07H1/06 |
| 代理公司： | 深圳市君胜知识产权代理事务所(普通合伙)44268 | 代理人： | 刘文求,王永文 |
| 地址： | 518102 广东省深圳市*** | 国省代码： | 广东;44 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 一种 烟酰胺单 核苷酸 纯化 方法 | ||
1.一种β-烟酰胺单核苷酸的纯化方法，其特征在于，包括以下步骤：
a、将经过预处理的β-烟酰胺单核苷酸溶液用膜浓缩设备先后进行微滤和纳滤，收集浓缩的粗品溶液；
b、将获得的粗品溶液pH值调至3-7，进样上反相高效液相色谱制备柱，固定相为十八烷基硅烷键合硅胶，流动相A为盐酸溶液配成的pH3-7的溶液，流动相B为乙醇，进行梯度洗脱纯化，得到纯化的样品溶液；
c、将纯化的样品溶液用膜浓缩设备进行纳滤后，用真空冷冻干燥机冻干，获得纯化的β-烟酰胺单核苷酸。
2.根据权利要求1所述的β-烟酰胺单核苷酸的纯化方法，其特征在于，所述步骤a中用于微滤的微滤膜孔径为0.2-1μm。
3.根据权利要求1所述的β-烟酰胺单核苷酸的纯化方法，其特征在于，所述步骤a中用于纳滤的纳滤膜，其截留分子量为200。
4.根据权利要求1所述的β-烟酰胺单核苷酸的纯化方法，其特征在于，所述步骤a中用于纳滤的纳滤膜为中空纤维膜。
5.根据权利要求1所述的β-烟酰胺单核苷酸的纯化方法，其特征在于，所述步骤a中浓缩的粗品溶液的浓度为20-30g/L。
6.根据权利要求1所述的β-烟酰胺单核苷酸的纯化方法，其特征在于，所述步骤c中纯化的样品溶液用膜浓缩设备进行纳滤后的浓度为100~150g/L。
7.根据权利要求1所述的β-烟酰胺单核苷酸的纯化方法，其特征在于，所述步骤b中按体积比计，流动相A：流动相B为2：98-1：1之间。
8.根据权利要求1所述的β-烟酰胺单核苷酸的纯化方法，其特征在于，所述步骤c中，用于纳滤的纳滤膜为截留分子量为200的中空纤维膜。
9.根据权利要求1所述的β-烟酰胺单核苷酸的纯化方法，其特征在于，所述步骤b中，梯度洗脱时的洗脱时间为40min。
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