[发明专利]一种美洲大蠊抗肿瘤活性提取物CⅡ-3的分子量检测方法

权利要求书

1.一种美洲大蠊抗肿瘤活性提取物CⅡ-3的分子量检测方法，其特征在于该方法包括下列步骤：

(1)色谱条件与系统：以Superdex Peptide 10/300GL或TSK G2000PWXL为色谱柱，以水(含0.1%TFA)-乙腈(0-50:100-50V/V)、磷酸盐缓冲液(pH=5~8)、Tris-HCl缓冲液(pH=7~9)中的一种为流动相，流速0.5~0.7ml/min，检测波长为200nm~400nm，进样量为5-50μl，柱温为20℃~30℃；

(2)标准物质溶液的配制：称取细胞色素C、VB12、氧化型谷胱甘肽、还原型谷胱甘肽、肌苷及酪氨酸适量，加水制成每1ml中各含0.1mg~2mg的溶液，分别过0.22μm滤膜，作为对照品溶液；

(3)标准曲线的绘制：分别吸取上述标准物质溶液进行色谱分析，以标准物质出峰的保留时间Rt(min)为横坐标，其分子量的对数Log（Mr）为纵坐标，绘制标准曲线方程；

(4)供试品溶液的制备：称取美洲大蠊抗肿瘤活性提取物CⅡ-3干粉20mg于10ml量瓶中，加水，摇匀，定容至刻度，用0.22μm滤膜过滤，即得；

(5)测定方法：吸取上述供试品溶液进行色谱分析，将样品出峰的保留时间代入标准曲线方程，可求得各峰的相对分子质量，通过面积归一化法可计算出不同分子量范围的相对百分比。

2.根据权利要求1所述的活性提取物CⅡ-3的分子量检测方法，其特征在于色谱条件与系统以Superdex Peptide 10/300GL为色谱柱，以乙腈:水(含0.1%TFA)=25:75为流动相，流速0.5ml/min，检测波长为214nm，进样量为20μL，柱温为25℃。