[发明专利]一种川百合组培快繁方法无效
申请号: | 201510124022.3 | 申请日: | 2015-03-22 |
公开(公告)号: | CN104663458A | 公开(公告)日: | 2015-06-03 |
发明(设计)人: | 黎有辉 | 申请(专利权)人: | 黎有辉 |
主分类号: | A01H4/00 | 分类号: | A01H4/00 |
代理公司: | 玉林市振盛专利商标代理事务所 45109 | 代理人: | 卢翔飞 |
地址: | 537823 广西壮族自*** | 国省代码: | 广西;45 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 百合 组培快繁 方法 | ||
1.一种川百合组培快繁方法,其特征在于包括以下步骤:
(1)外植体消毒:选取健康、无病害川百合鳞莲,将鳞片剥下大致分为外层麟片、中层鳞片和内层鳞片,分别用水洗去外部泥土,洗衣粉浸泡10~30min,然后置于自来水下冲洗30~60min,晾干,最后转入超净工作台上以70%~80%乙醇溶液浸泡20s~60s,无菌水冲洗4~6次,再用0.1%~0.2%升汞溶液消毒5~15min,然后用无菌水冲洗外植体至无泡沫为止,消毒期间注意振荡摇晃,使鳞片与消毒液、无菌水充分接触,最后将灭好菌的鳞片置于无菌的滤纸上吸干表面水分备用;
(2)不定芽诱导:将已经灭菌的鳞片切成1.0cm×l.Ocm左右的小块,小块四周均有切口,以鳞片的近轴面朝上的方式接种到诱导培养基进行不定芽诱导培养,接种后置于每天光照12~14小时,光照强度为1000~2000lx,置于培养温度为25~28℃,空气相对湿度为75%~80%的条件下培养15天后统计污染率,45天后统率诱导率;
增殖培养:将诱导所得到的不定芽切分成单芽接种到增殖培养基上进行继代培养,接种后置于每天光照12~14小时,光照强度为1000~2000lx,置于培养温度为25~28℃,空气相对湿度为75%~80%的条件下培养40天后统计增殖情况;
(4)生根培养:从基部切取步骤(3)增殖培养中获的小鳞茎并接种至生根培养基中进行诱导生根,接种后置于每天光照12~14小时,光照强度为2000~3000lx,置于培养温度为25~28℃,空气相对湿度为75%~80%的条件下培养30天后统计生根情况;
(5)炼苗移栽:挑选生长良好且根系较为发达的组培苗,进行炼苗,首先,将所选组培苗的瓶盖揭开,在组培室里炼苗1~3天,炼苗过程中,注意喷水保持湿度,然后将这些组培苗搬至炼苗室,炼苗2~5天,之后将小苗取出,洗净培养基,注意防止根系损伤,栽植到由园土:泥炭土:腐殖质=2:1:1混合成的基质中,移栽30天后统计成活率。
2. 根据权利要求1所述的一种川百合组培快繁方法,其特征在于步骤(2)所述的诱导培养基为:MS+0.1~1.0mg/LTDZ+1.0~3.0mg/L 6-BA+15~30g/L蔗糖+3.5~6.0g/L琼脂,pH为5.4~5.8。
3.根据权利要求1所述的一种川百合组培快繁方法,其特征在于步骤(3)所述的增殖培养基为:MS+1.0~3.0mg/L 6-BA+0.5~1.5mg/LNAA+15~30g/L蔗糖+3.5~6.0g/L琼脂,pH为5.4~5.8。
4.根据权利要求1所述的一种川百合组培快繁方法,其特征在于步骤(4)所述的生根培养基为:MS+0.1~1.0mg/LIBA+15~30g/L蔗糖+3.5~6.0g/L琼脂,pH为5.4~5.8。
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