[发明专利]一种捕获内皮祖细胞EPCs的新型抗凝血支架涂层的制备方法有效
申请号: | 201510124518.0 | 申请日: | 2015-03-20 |
公开(公告)号: | CN104758985B | 公开(公告)日: | 2017-10-24 |
发明(设计)人: | 赵安莎;薛国能;黄楠;杨苹;王艳 | 申请(专利权)人: | 西南交通大学 |
主分类号: | A61L33/08 | 分类号: | A61L33/08;A61L31/08 |
代理公司: | 成都信博专利代理有限责任公司51200 | 代理人: | 张澎,毛建平 |
地址: | 610031 四川省成都市*** | 国省代码: | 四川;51 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 捕获 内皮 细胞 epcs 新型 抗凝 支架 涂层 制备 方法 | ||
1.一种捕获内皮祖细胞EPCs的抗凝血支架涂层的制备方法,由如下步骤获得:
a)将需要的钛合金基底支架依次用SDS,乙醇,去离子水超声清洗三次,每次10min,然后在烘箱中干燥;
b)基底钛合金支架羟基化处理:将a)处理完成的钛合金基底支架放入浓硫酸与双氧水按照体积比7:3配比配制的溶液中在100℃浸泡1h,激活钛合金基底支架表面的羟基;然后用去离子水清洗3次,每次5min;
c)将b)步所得羟基化钛合金基底支架放到多巴胺溶液中,所述多巴胺溶液为dopamin溶解到以10mM,pH8.5Tris-base中制得;每次浸泡8h,每次浸泡完后用去离子水超声清洗3次,每次5min,连续3次,获得表面沉积多巴胺薄膜的基底支架,密封保存;
d)将配好一定浓度的CD133溶液和Fucoidan溶液各50μl滴加到支架基底材料表面;在37℃的孵箱中反应4h,然后用RO水,轻轻地清洗3次,然后用 N2干燥,得到目标产物;CD133与fucoidan反应的捕获涂层可以高效捕获外周血中来自骨髓的CD133,从而加快血管修复。
2.根据权利要求1所述捕获内皮祖细胞EPCs的抗凝血支架涂层的制备方法,其特征在于,通过QCM-D筛选出最优的pH和EDC/NHS/MES浓度作为构建CD133和Fucoidan的多功能复合涂层的反应条件,所述CD133与fucoidan反应的最佳pH为pH5.4,EDC/NHS/MES的浓度分别用PBS配制为10mM,20mM,50mM,最后用EDC稀释CD133溶液浓度到0.8-3.2μg/ml。
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