[发明专利]生产香紫苏醇的方法

权利要求书

1.一种生产香紫苏醇的方法，包括：

(a)将GGPP与至少一条具有LPP合酶活性的多肽接触，该多肽的氨基酸序列与SEQ IDNO:1或SEQ ID NO:2或SEQ ID NO:36～39中的任一者有至少98％的同一性，并且该多肽源自快乐鼠尾草；

(b)将步骤(a)中生产的LPP与至少一条具有香紫苏醇合酶活性的多肽接触，该多肽的氨基酸序列与SEQ ID NO:3或SEQ ID NO:74有至少98％的同一性，并且该多肽源自快乐鼠尾草；并且

(c)非强制性选择地将步骤(b)中生产的香紫苏醇分离。

2.权利要求1的方法，其中通过将GGPP与所述至少一条具有LPP合酶活性的多肽和所述至少一条具有香紫苏醇合酶活性的多肽一起接触来同时进行步骤(a)和步骤(b)。

3.权利要求1的方法，其中步骤(a)和步骤(b)通过将GGPP与至少一条融合多肽接触而同时进行，所述融合多肽能催化GGPP至香紫苏醇的转化，并包含源自快乐鼠尾草的、与SEQID NO:1或SEQ ID NO:2或SEQ ID NO:36～39中的任一者有至少98％同一性的氨基酸序列以及源自快乐鼠尾草的、与SEQ ID NO:3或SEQ ID NO:74有至少98％同一性的氨基酸序列。

4.权利要求1的方法，其中步骤(a)和步骤(b)同时进行，并包括在有助于香紫苏醇生产的条件下培养非人宿主生物体或细胞，该非人宿主生物体或细胞能生产GGPP，并且经转化以表达前述任一项权利要求所定义的至少一条具有LPP合酶活性的多肽以及前述任一项权利要求所定义的至少一条具有香紫苏醇合酶活性的多肽。

5.权利要求4的方法，还包括：在步骤(a)和步骤(b)之前，用源自快乐鼠尾草的、编码所述具有LPP合酶活性的多肽的至少一种核酸以及源自快乐鼠尾草的、编码所述具有香紫苏醇合酶活性的多肽的至少一种核酸来转化能生产GGPP的非人宿主生物体或细胞，从而所述生物体表达所述多肽。

6.权利要求5的方法，其中该编码具有LPP合酶活性的多肽的核酸的核苷酸序列与SEQID NO:4、SEQ ID NO:5、SEQ ID NO:28～31中的任一者或它们的补体有至少98％的同一性，并且/或者其中该编码具有香紫苏醇合酶活性的多肽的核酸的核苷酸序列与SEQ ID NO:6、SEQ ID NO:73或其补体有至少98％的同一性。

7.权利要求4或5的方法，其中所述非人宿主生物体或细胞用至少一种源自快乐鼠尾草的、编码融合多肽的核酸转化，从而所述生物体表达所述多肽，所述融合多肽能催化GGPP至香紫苏醇的转化，并包含源自快乐鼠尾草的、与SEQ ID NO:1或SEQ ID NO:2或SEQ ID NO:36～39中的任一者有至少98％同一性的氨基酸序列以及源自快乐鼠尾草的、与SEQ ID NO:3或SEQ ID NO:74有至少98％同一性的氨基酸序列。

8.权利要求7的方法，其中用于转化非人宿主生物体或细胞的核酸包含与SEQ ID NO:4、SEQ ID NO:5、SEQ ID NO:28～31中的任一者或它们的补体有至少98％同一性的核苷酸序列以及与SEQ ID NO:6、SEQ ID NO:73或其补体有至少98％同一性的核苷酸序列。

9.权利要求4～8中任一项的方法，其中所述非人宿主生物体是植物、原核生物或真菌。

10.权利要求4～8中任一项的方法，其中所述非人宿主生物体是微生物。

11.权利要求10的方法，其中所述微生物是细菌或酵母。

12.权利要求11的方法，其中所述细菌是大肠杆菌(E.coli)，所述酵母是酿酒酵母(Saccharomyces cerevisiae)。