[发明专利]用于对单个细胞所具有的细胞毒性进行评价的组合物以及方法在审
申请号: | 201510140107.0 | 申请日: | 2009-07-13 |
公开(公告)号: | CN104745669A | 公开(公告)日: | 2015-07-01 |
发明(设计)人: | J.C.洛夫;N.范阮达若詹;B.居尔格;B.沃克 | 申请(专利权)人: | 麻省理工学院;综合医院公司附属马萨诸塞州综合医院 |
主分类号: | C12Q1/04 | 分类号: | C12Q1/04;G01N33/569 |
代理公司: | 中国专利代理(香港)有限公司 72001 | 代理人: | 李慧惠;彭昶 |
地址: | 美国麻*** | 国省代码: | 美国;US |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 用于 单个 细胞 有的 毒性 进行 评价 组合 以及 方法 | ||
1.用以在宿主体内识别CD8+ 细胞的方法,其中所述的CD8+ 细胞能够CD4+ 人类免疫缺陷病毒感染型细胞进行溶解,所述的方法包括:
提供一种效应器CD8+ 细胞以及来自于宿主的靶向细胞的悬浮液,其中所述的悬浮液被沉积于一种可模压成型的平板之上,所述的平板上含有至少一个存在于微孔阵列之中的微孔,其中在所述的微孔阵列中的至少一个微孔中含有一个效应器细胞;
在允许利用所述的CD8+ 细胞对所述的靶向细胞进行溶解的条件下对所述的悬浮液进行培养;
对利用所述的效应器细胞对所述的靶向细胞所产生的溶解进行检测,并且
识别出那些能够对CD4+ 人类免疫缺陷病毒感染型细胞进行溶解的CD8+ 细胞。
2.根据权利要求1 中所述的方法,进一步的包括对溶解了所述的靶向细胞的效应器细胞进行回收。
3.根据权利要求2 中所述的方法,进一步的包括对已经溶解了所述的靶向细胞的效应器细胞进行培养。
4.根据权利要求1 中所述的方法,其中在将细胞沉积于所述的微孔内之前,对所述的效应器细胞以及靶向细胞进行混合。
5.根据权利要求1 中所述的方法,其中在将细胞沉积于所述的微孔内之后,对所述的效应器细胞以及靶向细胞进行混合。
6.根据权利要求1 中所述的方法,其中对溶解作用进行检测,所述的检测是通过对一种被标记细胞所具有的荧光性所发生的变化进行监测的方式来实现的。
7.根据权利要求1 中所述的方法,其中对溶解作用进行检测,所述的检测是通过对所述的靶向细胞所具有的细胞内的钙水平所发生的变化进行监测的方式来实现的。
8.根据权利要求7 中所述的方法,其中利用一种钙敏感型荧光染料对所述的钙进行检测。
9.根据权利要求8 中所述的方法,其中所述的染料是Fura 2AM(Invitrogen)。
10.根据权利要求1 中所述的方法,进一步的包括
将所述的微孔阵列与一种底物进行接触,其中利用至少一种试剂对所述的底物进行了预处理,所述的试剂能够特异性的检测出所述的效应器细胞所具有的产物;并且
利用所述的试剂进行检测。
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