[发明专利]缓冲水溶液中检测亲和素的近红外荧光探针的制备方法

权利要求书

1.缓冲水溶液中检测亲和素的近红外荧光探针的制备方法，其特征在于，包括：

将方酸菁染料(SQ)和二胺类物质加入到无水二氯甲烷溶剂中，室温下搅拌，制备得到中间产物SQ-n-NH₂，其中，n为二胺类物质中C原子数量的一半；

将制备得到的中间产物SQ-n-NH₂和三乙胺加入到无水N,N'-二甲基甲酰胺溶剂中混合，制备得到混合液A，其中，SQ-n-NH₂、三乙胺与无水N,N'-二甲基甲酰胺溶剂的摩尔比为1：0.19：166；将溶有N-羟基琥珀酰亚胺活化的生物素(Biotin-NHS)的无水N,N'-二甲基甲酰胺溶液逐滴加入到上述混合液A中，其中，溶有N-羟基琥珀酰亚胺活化的生物素(Biotin-NHS)的无水N,N'-二甲基甲酰胺溶液与混合液A的摩尔比为1：160.8，室温环境下搅拌过夜，得到近红外荧光探针。

2.根据权利要求1所述的缓冲水溶液中检测亲和素的近红外荧光探针的制备方法，其特征在于，包括：

将方酸菁染料(SQ)和二胺类物质加入到无水二氯甲烷溶剂中，在氮气流保护下，室温环境中搅拌，然后蒸除无水二氯甲烷溶剂后得到中间产物SQ-n-NH₂，所述中间产物SQ-n-NH₂为粗品SQ-n-NH₂，粗品SQ-n-NH₂不经纯化直接用于下一步反应；

将制备得到的中间产物SQ-n-NH₂和三乙胺加入到无水N,N'-二甲基甲酰胺溶剂中混合，制备得到混合液A，其中，SQ-n-NH₂、三乙胺与无水N,N'-二甲基甲酰胺溶剂的摩尔比为1：0.19：166；将溶有N-羟基琥珀酰亚胺活化的生物素(Biotin-NHS)的无水N,N'-二甲基甲酰胺溶剂逐滴加入到上述混合液A中，其中，溶有N-羟基琥珀酰亚胺活化的生物素(Biotin-NHS)的无水N,N'-二甲基甲酰胺溶液与混合液A的摩尔比为1：160.8，在氮气流保护下，室温环境中搅拌过夜，然后蒸除无水N,N'-二甲基甲酰胺溶剂后得到近红外荧光探针粗产品；经硅胶柱分离得到深蓝色固体，即得近红外荧光探针。

3.根据权利要求2所述的缓冲水溶液中检测亲和素的近红外荧光探针的制备方法，其特征在于，包括：

将方酸菁染料(SQ)和乙二胺加入到无水二氯甲烷溶剂中，所述方酸菁染料(SQ)和乙二胺的摩尔比为1:1.1，在氮气流保护下，室温环境中搅拌，然后蒸除无水二氯甲烷溶剂后得到中间产物SQ-NH₂(即SQ-n-NH₂，n＝1)，所述中间产物SQ-NH₂为粗品SQ-NH₂，粗品SQ-NH₂不经纯化直接用于下一步反应；

将制备得到的中间产物SQ-NH₂和三乙胺加入到无水N,N'-二甲基甲酰胺溶剂中混合，制备得到混合液A；将溶有N-羟基琥珀酰亚胺活化的生物素(Biotin-NHS)的无水N,N'-二甲基甲酰胺溶剂逐滴加入到上述混合液A中，所述SQ-NH₂和N-羟基琥珀酰亚胺活化的生物素(Biotin-NHS)的摩尔比可以为1:0.3，所述三乙胺、加入SQ-NH₂和三乙胺的无水N,N'-二甲基甲酰胺溶剂和加入N-羟基琥珀酰亚胺活化的生物素(Biotin-NHS)的无水N,N'-二甲基甲酰胺的体积比为0.03:15:5；在氮气流保护下，室温环境中搅拌过夜，然后蒸除无水N,N'-二甲基甲酰胺溶剂后得到近红外荧光探针粗产品；经硅胶柱分离得到深蓝色固体，即得近红外荧光探针。

4.根据权利要求1或2中所述的缓冲水溶液中检测亲和素的近红外荧光探针的制备方法，其特征在于，所述二胺类物质包括：乙二胺、丁二胺和己二胺。

5.根据权利要求1或2所述的缓冲水溶液中检测亲和素的近红外荧光探针的制备方法，其特征在于，所述方酸菁染料(SQ)和二胺类物质的摩尔比为1:1.1。