[发明专利]一种利用木质纤维素水解液生产益生菌的方法

权利要求书

1.木质纤维素水解液在提高凝结芽孢杆菌的芽孢浓度方面的应用，其特征在于，所述木质纤维素水解液是由农林生物质原料经过1～4%的硫酸105～130℃水解处理1～2 h后，真空抽滤，滤液再经Ca(OH)₂脱毒处理获得，所述农林生物质原料是水稻秸秆、米糠、甘蔗渣、花生壳、核桃壳或麸皮中一种或几种。

2.根据权利要求1所述应用，其特征在于，所述应用的方法是凝结芽孢杆菌以木质纤维素水解液为碳源进行发酵。

3.根据权利要求1所述应用，其特征在于，所述农林生物质原料是水稻秸秆。

4.使用权利要求1所述木质纤维素水解液提高凝结芽孢杆菌芽孢浓度的方法，其特征在于，步骤如下：

S1.利用农林生物质原料制备木质纤维素水解液；

S11.将农林生物质原料粉碎至粉状，按固液比10g：100mL的比例，将粉碎后的农林生物质原料与2%的硫酸混合，在121℃下反应1.5 h后真空抽滤，得滤液；其中，所述农林生物质原料是水稻秸秆、米糠、甘蔗渣、花生壳、核桃壳或麸皮中一种或几种；

S12.向S11得到的滤液中加入Ca(OH)₂，调节溶液pH至9.0～10.0，沉降1h后抽滤抽取滤液；

S13.用2M H₂SO₄将S12得到滤液的pH调至6.0，静置1h后抽滤抽取滤液；

S2.将木质纤维素水解液加入到凝结芽孢杆菌发酵培养液中，接种凝结芽孢杆菌进行发酵；木质纤维素水解液的用量占加入木质纤维素水解液后发酵培养液总量的10～50v/v%；

步骤S2所述发酵培养液不含其它碳源，仅以木质纤维素水解液作为碳源。

5.根据权利要求4所述方法，其特征在于，步骤S1所述农林生物质原料是水稻秸秆。

6.根据权利要求4所述方法，其特征在于，步骤S2所述发酵培养液的配方为：磷酸氢二钾2 g/L，磷酸二氢钾1.0 g/L，硫酸镁2 g/L，三氯化铁0.28 g/L，硫酸铵0.6 g/L，酵母膏0.8 g/L，pH7.0～7.4；

步骤S2所述接种凝结芽孢杆菌进行发酵的具体步骤为：

S21.种子液培养：将斜面菌种挑入到灭菌的种子培养基中，30℃、150rpm振荡培养24h，发酵液即为种子液；所述种子培养基为牛肉膏蛋白胨培养基；

S22.发酵培养：将种子液按2v/v%的比例接种到添加有木质纤维素水解液的发酵培养液中，30℃、180rpm振荡培养24h。