[发明专利]一种从甜茶中制备甜茶素的方法

说明书

技术领域

本发明涉及生物技术领域的制备方法，具体说是一种从甜茶中制备甜茶素的方法。

背景技术

甜茶，又名广西甜茶，学名Rubus Suavissmus S,Gee.英文名Sweet tea，是蔷薇科悬钩子属植物中的一种，为多年生有刺落叶灌木，高1-2m，单叶，矩圆状卵形，长5-10m，叶柄长1.5-4cm。花单生叶腋，白色，直径2-3cm，垂生；萼裂片长矩圆状卵形，渐尖，无毛。聚合果球形、黄色。它和普通悬钩子不同之处是叶子味甜。甜茶全身是宝，根、茎、叶、果实均可入茶入药。甜茶叶常用来作为甜味剂加工食品，民间入药用于补肾降压，被誉为神茶，与罗汉果、合浦珍珠、广西香料等齐名为广西十大名品。甜茶鲜果别名树莓，营养丰富，红里透亮，果肉甜，清香味鲜，肉味独特，特别是富含抗癌物质—鞣花酸，被称为第三代水果；其干果实可作为中药覆盘子(或覆盆子)使用。甜茶叶虽然在广西民间应用已久，但我国八十年代初药物调查时才发现这个新变种。广西甜茶生长在海拔800-1000m左右的荒山上，主产区在广西大瑶山地区，主要分布在广西其它地区及广东、湖南、江西等省。悬钩子在我国其它地方都可见到，却没有这种甜味。因此，学者们认为甜茶应定为一个新变种。

据《广西中药标准》记载，广西甜茶有“清热降火、润肺、祛痰、止咳的功效”。被誉为“神茶”，其药用性和食用性已为地方医药和民间所证实，广西甜茶中还含有3.2％以上的黄酮、8.94％的甜茶茶多酚和4-5％的甜茶素。甜茶茶多酚有明显抗氧化、抗突变、防癌、降低胆固醇、降低血液中低密度脂蛋白、抑制血压上升、抑制血糖上升、抑制血小板凝集、抗菌、抗食物过敏、改善肠胃微生物环境、消臭的作用，是目前发现最理想的纯天然抗氧化剂，用途十分广泛。研究发现，甜茶素是一种高甜度的甜味剂，其甜度为蔗糖的300倍，它是斯替维醇(Steviol)和葡萄搪结合而成的二萜甙。甜茶素分子式C₃₂H₅₀O₁₂，在化学结构上与甜叶菊甙(Stevioside，斯替维甙)相似，均由相同的甙元组成，其区别仅在C₁₃位上少接一分子葡萄搪。广西甜茶中甜茶素的含量一般在4-6％；广西甜茶中的甜茶素主要存在于甜茶叶中，其含量受多种因素的影响：首先受产地的影响，不同地区所产的甜茶叶中的甜茶素含量不一样，广西金秀县所产的甜茶叶中甜茶素的含量最高，其含量高达8.07％。此外，广西甜茶中甜茶素的含量与其生长时期有关，不同生长发育阶段叶子中甜茶素的含量有着明显的差异，嫩叶中最高，成叶次之，落叶最低；甜茶叶中甜茶素的含量与季节也有关系，5月底较高，6月底开始上升，7、8两月达到最高，9月底以后开始下降，12月底降到最低值。

甜茶素是一种低热量甜味剂，是能替代糖的高甜度而低热能且无毒的天然甜味剂。通过对甜茶的深加工，得到天然健康的活性成分具有很好的市场前景，也符合人们对自然健康的追求。

发明内容

本发明的目的是提供一种从甜茶中制备甜茶素的方法，具有工艺简单，适合生产，生产成本低等优点。

本发明通过以下技术方案实现，具体包括如下步骤：

1)原料处理：将甜茶的叶片粉碎；

2)高压微射流超微粉碎处理：将粉碎后的甜茶按照1:8-10的重量比加入纯净水，用高速剪切乳化机处理10-20min，转速为8000-12000r/min，然后用高压微射流超微粉碎设备于25℃进行处理，处理压力为80-120MPa，处理次数为2-4次，得到膏状浆液；

3)发酵：将步骤2)得到的膏状浆液经过超高温瞬时灭菌，然后调整pH6.5-7.0，按体积百分比为10-15％接入培养成熟的乳酸菌液体菌种，放入发酵罐中发酵，发酵温度在35-37℃，发酵时间3-4h；

4)步骤3)得到的发酵液经过超高温瞬时灭菌，离心，上清液进行HP20SS树脂柱层析，再用50-60％的乙醇溶液洗脱，经浓缩、喷雾干燥，得到甜茶素。

本发明步骤3)中乳酸菌为保加利亚乳杆菌、嗜酸乳杆菌、嗜热链球菌、乳脂链球菌、两歧双歧杆菌、婴儿双歧杆菌、长双歧杆菌。

步骤4)所述的HP-20ss树脂柱，树脂用量为上清液重量的40-60倍。

本发明得到的甜茶素，为白色粉末，经HPLC检测，含量在99％以上。

与现有技术相比，本发明的优点：