[发明专利]一种盐藻培养方法

权利要求书

1.一种盐藻培养方法，其特征在于具体包括盐藻繁殖和β-胡萝卜素积累两个步骤：

(1)盐藻繁殖：先在盐藻培育反应器内安置光源，调整光照强度为2000—4000Lx，温度为25—28℃，盐藻培养剂中的盐的重量百分比浓度为1—1.2％，氮源为1—1.5mL，磷源为0.3mL，无机碳源为10—15mL，在盐藻培养剂中接种盐藻，盐藻培育分别经国1—2天的生长期、1—2天的对数生长期和1—2天的平台期后分别测量盐藻培养剂中氮源、磷源和无机碳源使其分别达到0.5mL、0.1mL和10mL以下时，进行盐藻生物量测定，使其达到最高值，完成盐藻繁殖；

(2)β-胡萝卜素积累：再将盐藻培育反应器内所安置的光源调节光照强度为7000—9000Lx，温度为31—35℃，用添加食盐、KNO₃、KH₂PO₄、NaHCO₄的方法调整盐藻培养剂，使盐的含量重量百分比浓度为3.2—3.5％，氮源为0.5mL，磷源为0.1mL，无机碳源为10mL，再经3—5天培养后盐藻由深绿色逐渐变成褐色，实现β-胡萝卜素的积累，然后测定其β-胡萝卜素达到预期值，完成盐藻的培养。

2.根据权利要求1所述的盐藻培养方法，其特征在于盐藻生物量测定工艺方法是：取1mL盐藻繁殖阶段的盐藻培养剂，用0.1mL无水酒精麻醉后滴入血球计数板测量得1mL中微藻绝对值，同时用分光光度计在吸光度A700nm时测定微藻绝对值对应的光密度，分别测量5次得5个微藻绝对值和光密度，并按照微藻绝对值和光密度对应关系绘制盐藻生物量标准曲线，以后只需测定盐藻光密度即可对应得出盐藻生物量，实现盐藻生物量的测定。

3.根据权利要求1所述的盐藻培养方法，其特征在于β-胡萝卜素测定工艺方法是：取5mLβ-胡萝卜素积累阶段的盐藻培养剂，加入一滴重量百分比浓度为20％的氢氧化钠混匀后以3000r/min的速度离心3分钟，弃上清液；再加入一滴重量百分比浓度为80％的丙酮水溶液摇匀后离心1分钟，提取色素，反复提取至盐藻培养剂为无色，合并含丙酮提取液定容为25mL混合液，用分光光度计在吸光度A450nm时测定混合液光密度，然后依据盐藻生物量测定的对应关系推得盐藻中β-胡萝卜素的值。