[发明专利]一种玛咖多倍体植株的培育方法

说明书

技术领域

本发明属于生物技术领域，涉及一种药食两用植物新品种的选育方法，具体涉及一种玛咖多倍体植株的培育方法。

背景技术

玛咖Lepidiummeyenii为十字花科（Brassicaceae）独行菜属（Lepidium）一年生草本植物，原产于秘鲁海拔 3500 m 以上的安第斯山区，可在无肥料、缺氧、昼夜温差大、长期冰封的独特环境下正常生长。玛咖在营养成分和增强精力、耐力的功效方面可以与人参媲美，因此又常被称为“Peruvian Ginseng（秘鲁人参）”。由于玛咖在生长中吸取了大量的土壤养分，原始耕作情况下，玛咖根采收后的土地需要休耕数年才能再次种植，因此玛咖一度曾濒临绝种，被国际上列为濒危植物。直到 1982 年，在联合国粮农组织（FAO）和国际植物遗传资源研究所（IPGRI）等国际组织的努力下，这种珍贵的植物才得以逐步推广，嘉惠世人。此后，FAO 等国际组织又先后多次向各国推荐种植和食用玛咖，并指出玛咖是一种营养丰富的安全食物，可以解决多种因营养不足引起的健康问题。玛咖自2002年引进中国以来，十分适宜在我国西部高寒地区生长，现已在云南会泽，新疆，西藏等地成功种植，并开始了产品加工，具有很好的市场前景，同时对改善西部生态环境、发展当地经济也将起到积极的推动作用。玛咖在中国的种植现主要集中在云南（占全国的98%），新疆（占全国的1%），西藏（占全国的0.5%），四川（占全国的0.5%），种植海拔在2500米以上。云南现有的种植规模已有10000亩左右，年产玛咖干果干片原料250吨，目前已基本满足初级市场的需求量。但随着市场的扩大，参照国外市场看，最终将会形成以玛咖食品、保健品、药品、食品添加剂、药品添加剂等形态的玛咖产业链，玛咖原料的需求量将会出现井喷现象。对此，云南省政府已经出台了“加快玛咖产业发展的若干意见”，将玛咖产业列为十二五重点发展的农业及生物产业对象，提出5年内建设5万亩的目标，至十二五结束达到15—20万亩的目标。

植物多倍体的典型遗传特征是营养器官的巨大性，特别是对地下变态营养器官如块根类植物具有特殊的增产效果，在以此类营养器官入食、入药的植物上具有重要的育种价值；同时植物多倍体提高了主要化学成分含量，可大幅度提高栽培植物的品质。这些对于以块根为入食、入药的玛咖来说，更是意义重大。

发明内容

本发明所要解决的技术问题是，针对现有玛咖品质及产量较低的问题，提供一种玛咖多倍体植株的培育方法，选育出一批多倍体玛咖新种质，为玛咖多倍体育种奠定技术基础，同时亦可提供基因型背景一致的多倍体种苗以满足人工种植的需求。

为了解决以上所述技术问题，本发明所述玛咖多倍体植株的培育方法包括以下步骤：

（1）以B₅为基本培养基，附加蔗糖20000mg/L和琼脂粉4800mg/L，调整pH值为5.4-5.8，制得培养基A；用细纱布将玛咖种子按100粒/包，包好放到流水下冲洗2 h后，置于超净工作台上，用体积比75％的酒精浸泡60 s，再用质量比0.1％HgCl₂灭菌8 min，最后用无菌水冲洗10次，每次不低于2 min，之后放在无菌滤纸上，打开细纱布吸干表面水分，得到消毒灭菌处理的种子，将所述消毒灭菌后的玛咖种子接种于所述基培养基A中，在光照度1500-2000 lx，光照时间10 h/d，温度控制在20±1℃的条件下，进行种子萌发；

（2）以B₅为基本培养基，附加萘乙酸NAA1.5-2.0 mg/L、玉米素ZT0.1-1.0 mg/L、秋水仙素0.5-2.0 mg/L、蔗糖20000mg/L和琼脂粉4800mg/L，调整pH值为5.4-5.8，制得愈伤组织诱导培养基B；所述步骤（1）中种子培养5-7d，幼苗子叶完全展开，将下胚轴切为0.5-1.0 cm大小，转接至所述愈伤组织诱导培养基B中，在光照度1500-2000 lx，光照时间10 h/d，温度控制在20±1℃的条件下，培养5d后有愈伤组织出现，20d后愈伤组织生长迅速，质地紧密，表被白色绒毛；