[发明专利]从苹果皮中提取原花青素的方法

说明书

技术领域

本发明涉及从植物中提取原花青素的方法，具体涉及一种从苹果皮重提取原花青素的方法，属于生物化工领域。

背景技术

原花青素(Oligomer Procyanidoic Complexes)，简称OPC，是一种有着特殊分子结构的生物类黄酮，是目前国际上公认的清除人体内自由基最有效的天然抗氧化剂。一般为红棕色粉末，气微、味涩，溶于水和大多有机溶剂。

原花青素在生活中应用很广泛，例如在皮肤方面，原花青素具有独特的化学和生理活性，在护肤品中起到多重作用，如抗衰老、抗紫外线、抗辐射、增白、保湿等。原花青素对多种因素造成的皮肤老化都有独特的功效；原花青素对毛囊细胞有增殖和再生功能，从而能促进毛发生长和再生等。所以对于原花青素的研究是很有意义和前景的。

原花青素在葡萄籽等植物中均有分布，目前研究较多的是如何从葡萄籽中分离提取原花青素。

随着植物研究范围的扩大，目前越来越多的基础研究显示苹果皮中也存在原花青素。苹果为我国产量最大的水果，资源十分丰富，有着很好的营养价值和特殊的保健作用，苹果中的多酚能够抑制癌细胞的增殖。其中，原花青素为苹果中的主要酚类成分，具有多种生物活性，有很强的抗氧化效果。由于苹果幼果富含原花青素，苹果成熟后，原花青素主要存在于果皮中。因此，用苹果皮提取原花青素具有深远的经济效益和社会效益。

但是，现有技术中对于苹果皮中原花青素的研究还是空白，而目前较为成熟的原花青素提取工艺又是以葡萄籽这类种子为研究基础，因此对从苹果皮中提取原花青素的方法指导参考意义较弱。

发明内容

本发明的目的在于填补目前技术中的空白，创造性的公开一种从苹果皮中提取原花青素的方法，所述提取方法是以微波联合酶法来提取苹果皮中的原花青素，所述提取方法是将苹果皮在复合酶的酶解作用后，再以微波萃取的方式提取其中的原花青素，所述的酶是由纤维素酶、半纤维素酶以及果胶酶组成的复合酶。

作为一种优选的方式，我们公开了所述酶是由等质量的纤维素酶、半纤维素酶以及果胶酶组成的复合酶。

同时，我们还公开了所述酶解的优选条件为pH 4.5~5.0，酶解时间40~50分钟，酶解温度40~60℃。

进一步地，最为优选地条件是pH 5.0，酶解时间50分钟，酶解温度50℃。

另外，我们还优选所述复合酶的添加量为每100g苹果中添加复合酶3mg。其中特别优选的方式是所述复合酶是由纤维素酶1mg、半纤维素酶1mg、果胶酶1mg组成。

另外，在微波萃取中，我们还优选了所述微波功率为300W。

最后，我们公开了这一微波联合酶法从苹果皮中提取原花青素的具体工艺，包括以下步骤：

（1）将苹果皮粉碎、制成粉末后过筛，加入pH为4.5~5.0的缓冲溶液；

（2）向苹果皮的缓冲溶液中，加入纤维素酶、半纤维素、果胶酶形成的复合酶液，在40~60℃的条件下，酶解40~50分钟；

（3）将酶解后的混合液在微波功率300W，频率2450MHz，温度60~80℃的条件下萃取2~5分钟；

（4）将萃取液趁热过滤，并将滤液在3000r/min的条件下离心，取上层清液，即为原花青素溶液。

优选地，萃取时间为3分钟；缓冲溶液的加入量与苹果皮粉末的料液比为1g/10mL。

采用本发明所公开的方法，填补了目前从苹果皮中提取原花青素的技术空白，同时也为从果实皮中提取原花青素提供了重要的技术指引。利用这一方法可以高收率、无破坏的从苹果皮中提取得到原花青素，具有重要的经济价值。

具体实施方式

实施例中所用的材料及试剂、仪器来源。

苹果购自南京晓庄学院水果超市，自行处理得到苹果皮，粉碎，过40~60目筛，作为苹果皮待测试样。

试剂：无水乙醇，南京化学试剂有限公司；

甲醇，南京化学试剂有限公司；

正丁醇，南京化学试剂有限公司；

盐酸，上海中试化工总公司；

硫酸铁铵，国药集团化学试剂有限公司；

原花青素标样，中国药品生物制品检定所；

以上试剂均为分析纯。

纤维素酶，酶活≥30000u/g；果胶酶，酶活≥30000u/g；半纤维素酶，酶活≥10000u/g；蛋白酶，酶活≥50000u/g，上海蓝季科技发展有限公司。