[发明专利]一种中药复方制剂中赤芍、金银花多指标成分含量测定方法

说明书

技术领域

本发明涉及一种中药复方制剂的含量测定方法，特别涉及一种中药复方制剂中赤芍和金银花的含量测定方法，属于医药技术领域。

背景技术

抗感系列制剂(抗感颗粒和抗感胶囊)由金银花、赤芍、绵马贯众等3味药组成，处方中3味药材重量比为3:3:1，具有清热解毒的功效，用于外感风热引起的感冒。抗感颗粒执行《中国药典》2010年版第一增补本标准；抗感胶囊执行国家药品监督管理局国家药品标准WS₃-225(X-215)-2002Z。标准收载项目均包括：绿原酸和芍药苷的薄层色谱鉴别；芍药苷的HPLC含量测定。

金银花为方中主药，上述标准均以绿原酸的薄层色谱鉴别控制金银花的投料，未进行金银花内含成分的含量测定，这不能制止药材少投料的问题，难以保证药物的有效性。文献RP-HPLC法测定抗感颗粒中芍药苷和绿原酸的含量(中国药房2011年22卷40期3820页)提供了抗感颗粒中赤芍和金银花的含量测定方法，其中金银花的指标成分仅使用了绿原酸。但绿原酸是一种多种植物共有的成分，甚至在废弃烟叶中也能分离得到，提取率达到1.71％。仅以绿原酸作为指标成分，控制金银花制剂的质量显然是不够的。文献HPLC法同时测定银黄含片中6个咖啡酰奎宁酸类成分的含量(药物分析杂志2012年32卷1期57页)对银黄含片中金银花药材6个指标成分：3-O-咖啡酰奎宁酸、5-O-咖啡酰奎宁酸、4-O-咖啡酰奎宁酸、4,5-O-二咖啡酰奎宁酸、3,5-O-二咖啡酰奎宁酸、3,4-O-二咖啡酰奎宁酸进行含量测定。该文献在327nm波长处测定，而芍药苷在327nm左右则没有吸收，其含量测定一般使用其最大吸收波长230nm，因而该文献条件下不能同时实现芍药苷的含量测定。目前，现有技术中没有对制剂中芍药苷和上述6个咖啡酰奎宁酸同时进行含量测定的方法。

发明内容

针对现有技术的不足，本发明的目的是提供一种中药复方制剂中赤芍和金银花多成分含量测定方法。其中，赤芍指标成分为芍药苷，金银花指标成分为6个咖啡酰奎宁酸，包括3-O-咖啡酰奎宁酸、绿原酸(5-O-咖啡酰奎宁酸)、4-O-咖啡酰奎宁酸、4,5-O-二咖啡酰奎宁酸、3,5-O-二咖啡酰奎宁酸、3,4-O-二咖啡酰奎宁酸。

术语说明：

抗感颗粒是中国药典2010年版第一增补本记载的药品名称。处方量：金银花700g、赤芍700g、绵马贯众233g，制成总量：1000g。

抗感胶囊是国家食品药品监督管理局国家药品标准新药转正标准第38册记载的药品名称。标准编号：WS₃-225(X-215)-2002Z。处方量：金银花1500g、赤芍1500g、绵马贯众500g，制成总量：450g。

发明概述

本发明使用一个色谱条件同时对中药复方制剂中赤芍(芍药苷)和金银花(6个咖啡酰奎宁酸)进行了含量测定，操作简便，分析数据准确。既节省了分析人员的分析时间，提高了工作效率，同时又提高了制剂的安全性、有效性及可控性。

本发明的技术方案如下：

一种中药复方制剂中赤芍、金银花多指标成分含量测定方法，步骤如下：

照《中国药典》2010年版一部附录ⅥD的高效液相色谱法测定；

色谱条件与系统适用性试验：

以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以乙腈为流动相A，以体积份数比0.1％～1％的磷酸溶液为流动相B，采用梯度洗脱方式：0min→14min→22min→23min→38min→39min；乙腈：8％→16％→16％→24％→24％→8％，体积份数比0.1％～1％的磷酸溶液：92％→84％→84％→76％→76％→92％；采用波长切换方式检测：0～22min，在317～337nm波长下检测3-O-咖啡酰奎宁酸、5-O-咖啡酰奎宁酸、4-O-咖啡酰奎宁酸；22～26min，在220～240nm波长下检测芍药苷；26～38min，在317～337nm波长下检测4,5-O-二咖啡酰奎宁酸、3,5-O-二咖啡酰奎宁酸、3,4-O-二咖啡酰奎宁酸；柱温4～15℃；理论板数按绿原酸峰计算应不低于2000，按芍药苷峰计算应不低于5000；