[发明专利]一种肺炎克雷伯菌碳青霉烯酶基因型检测方法

权利要求书

1.一种非疾病诊断目的的肺炎克雷伯菌碳青霉烯酶基因型检测方法，其特征在于所述方法为：以待测菌株基因为模板，在引物1和引物2作用下进行PCR扩增反应，然后以扩增产物为模板，在引物3-引物8的混合引物作用下进行SNaPshot PCR反应，对SNaPshot PCR产物进行测序；

若SNaPshot PCR产物在147位、308位和814位均为C碱基，272位为T碱基，502位为G碱基，716位为A碱基，则待测菌株的碳青霉烯酶基因型为KPC-1或KPC-2；

若SNaPshot PCR产物在147位、308位为C碱基，272位和814位为T碱基，502位为G碱基，716位为A碱基，则待测菌株的碳青霉烯酶基因型为KPC-3；

若SNaPshot PCR产物在147位、716位和814位为C碱基，在308位和502位为G碱基，在272位为T碱基，则待测菌株的碳青霉烯酶基因型为KPC-4；

若SNaPshot PCR产物在147位和814位为C碱基，在308位和502位为G碱基，在272位为T碱基，在716位为A碱基，则待测菌株的碳青霉烯酶基因型为KPC-5；

若SNaPshot PCR产物在147位、308位、716位和814位为C碱基，在272位为T碱基，在502位为G碱基，则待测菌株的碳青霉烯酶基因型为KPC-6；

若SNaPshot PCR产物在147位、272位和814位为T碱基，在308位为C碱基，在502位为G碱基，在716位为A碱基，则待测菌株的碳青霉烯酶基因型为KPC-7；

若SNaPshot PCR产物在147位、308位和716位为C碱基，在272位和814位为T碱基，在502位为G碱基，则待测菌株的碳青霉烯酶基因型为KPC-8；

若SNaPshot PCR产物在147位和308位为C碱基，在272位和814位为T碱基，在502位和716位为G碱基，则待测菌株的碳青霉烯酶基因型为KPC-9；

若SNaPshot PCR产物在147位为C碱基，在308位和502位为G碱基，在272位和814位为T碱基，716位为A碱基，则待测菌株的碳青霉烯酶基因型为KPC-10；

若SNaPshot PCR产物在147位和814位为C碱基，在502位为G碱基，在308位和272位为T碱基，716位为A碱基，则待测菌株的碳青霉烯酶基因型为KPC-11；

若SNaPshot PCR产物在147位、308位和814位为C碱基，在272位和502位为T碱基，716位为A碱基，则待测菌株的碳青霉烯酶基因型为KPC-12；

若SNaPshot PCR产物在147位、308位和272位为C碱基，在502位为G碱基，在814位为T碱基，716位为A碱基，则待测菌株的碳青霉烯酶基因型为KPC-13；

若SNaPshot PCR产物在147位、308位、272位和814位为C碱基，在502位为G碱基，716位为A碱基，则待测菌株的碳青霉烯酶基因型为KPC-14；

若SNaPshot PCR产物在147位和716位为C碱基，在308位和502位为G碱基，在272位和814位为T碱基，则待测菌株的碳青霉烯酶基因型为KPC-15；

引物1为：5’-CTGTATCGCCGTCTAGTTCTGCTGT-3’；

引物2为：5’-CAGAGCCTTACTGCCCGTTGA-3’；

引物3为：5’-(T)₃GCGCCTGAGCCGGTATC-3’；

引物4为：5’-(T)₉GCAAAAATGCGCTGGTTC-3’；

引物5为：5’-(T)₁₄CCGTAACGGATGGGTGTG-3’；

引物6为：5’-(T)₂₀GGGATGGCGGAGTTCA-3’；

引物7为：5’-(T)₂₈GTCATTTGCCGTGCCATAC-3’；

引物8为：5’-(T)₃₈GCGCCTAACAAGGATGACAAG-3’。