[发明专利]香附药材指纹图谱的构建方法及其检测方法

说明书

技术领域

本发明涉及分析检测技术领域，特别是涉及一种香附药材指纹图谱的构建方法及其检测方法。

背景技术

香附为莎草科植物莎草的干燥根茎。性辛，微苦，微甘，平。气香，味微苦。具有疏肝解郁，理气宽中，调经止痛之功效。用于肝郁气滞，胸肋胀痛，疝气疼痛，乳房胀痛，脾胃气滞，脘腹痞闷，胀满疼痛，月经不调，闭经痛经等症。

香附为干燥根茎入药，目前存在着多种根茎入药的香附已混淆品，例如水香附、竹节香附等，而现有技术中对于检测香附真伪的方法较为复杂，且结果误差较大。因此，有必要建立一种全面、直观、快速的检测方法。

发明内容

基于此，本发明提供了一种香附药材指纹图谱的构建方法。

具体的技术方案：

一种香附药材指纹图谱的构建方法，包括如下步骤：

(1)对照品溶液的制备：

精密称取α-香附酮对照品，加甲醇稀释，得对照品溶液；

(2)供试品溶液的配制：

精密称取香附药材粉末，加入甲醇，超声提取或回流提取20-40min，过滤，即得所述供试品溶液；

(3)测定：

分别精密吸取供试品溶液和对照品溶液，注入高效液相色谱仪中进行测定，得到由16个共有特征峰构成的香附药材指纹图谱。

在其中一个实施例中，步骤(3)中，高效液相色谱仪的条件为：色谱柱为C18色谱柱；流动相：甲醇为流动相A，水为流动相B，采用梯度洗脱方式；流速为0.8-1.2ml/min；检测波长为252-256nm；柱温23-27℃。

在其中一个实施例中，所述梯度洗脱方式为：0-45min，流动相A的体积百分数由40％变化至80％；45-60min，流动相A的体积百分数维持80％。

在其中一个实施例中，检测波长为254nm，柱温为25℃。

本发明的另一目的是提供一种香附药材指纹图谱的检测方法。

具体的技术方案如下：

一种香附药材指纹图谱的检测方法，包括如下步骤：

(1)对照品溶液的制备：

精密称取α-香附酮对照品，加甲醇稀释，得对照品溶液；

(2)供试品溶液的配制：

精密称取香附药材粉末，加入甲醇，超声提取或回流提取20-40min，过滤，即得所述供试品溶液；

(3)测定：

分别精密吸取供试品溶液和对照品溶液，注入高效液相色谱仪中进行测定，即得。

在其中一个实施例中，步骤(3)中，高效液相色谱仪的条件为：色谱柱为C18色谱柱；流动相：甲醇为流动相A，水为流动相B，采用梯度洗脱方式；流速为0.8-1.2ml/min；检测波长为252-256nm；柱温23-27℃。

在其中一个实施例中，所述梯度洗脱方式为：0-45min，流动相A的体积百分数由40％变化至80％；45-60min，流动相A的体积百分数维持80％。

在其中一个实施例中，步骤(3)中，高效液相色谱仪的条件为：色谱柱为C18色谱柱；流动相：甲醇为流动相A，水为流动相B，采用梯度洗脱方式，所述梯度洗脱方式为：0-45min，流动相A的体积百分数由40％变化至80％；45-60min，流动相A的体积百分数维持80％。；流速为1.0ml/min；检测波长为254nm；柱温25℃。

本发明的有益效果如下：

本发明经发明人的大量实验和研究，确定了制备供试品溶液和对照品溶液的方法，及高效液相色谱仪的色谱条件的最优参数，由此构建出香附药材的指纹图谱。采用本申请方法构建的指纹图谱以及检测方法可以准确地鉴定香附药材，精密度高，且节约试剂。

附图说明

图1a为溶剂峰比较图；

图1b为标准品α-香附酮HPLC图；

图2为不同流动相HPLC图；

图3为流动相不同起始梯度HPLC图；

图4为流动相不同梯度HPLC图；

图5为不同流速HPLC图；

图6为不同柱温HPLC图；

图7为不同波长HPLC图；

图8为不同色谱柱HPLC图；

图9为六种提取溶剂HPLC图；

图10为不同提取体积HPLC图；

图11为不同种提取方法HPLC图；

图12为不同提取时间HPLC图；