[发明专利]一种新的灵芝三萜及其制备方法和医药用途

说明书

技术领域

本发明涉及一种从灵芝中分离出的具有抗肿瘤作用并可抑制肿瘤细胞的多重耐药性（MDR）的新化合物。

本发明还涉及该化合物的制备方法。

本发明还涉及以该化合物在制备抗肿瘤药物中的应用。

背景技术

恶性肿瘤常称癌症，是严重威胁人类健康的常见病、多发病。目前治疗恶性肿瘤的三大主要方法包括化学治疗、外科手术和放射治疗。其中化疗在肿瘤的综合治疗中仍占有极为重要的地位，然而对占恶性肿瘤90%以上的实体瘤的治疗目前仍未能达到满意的疗效，其存在两大主要障碍：药物的耐药的产生和毒性反应。细胞毒类抗肿瘤药在杀伤肿瘤细胞的同时，对正常组织细胞也产生不同程度的损伤作用，那是由于其对肿瘤细胞缺乏足够的选择性，因此毒性反应成为肿瘤化疗时药物用量受限的关键因素。化疗过程中肿瘤细胞对药物产生不敏感现象即耐药性是肿瘤化疗失败的重要原因，亦是肿瘤化疗急需解决的难题。因此如何提高化疗治疗指数，如何突破化疗两大障碍已成为目前研究的热点。从中草药中寻找毒性低、疗效高的抗肿瘤活性成分成为当今抗肿瘤药物发展战略中的要点之一。由于植物所含的天然化合物具有来源广泛、价格低廉、毒性低等优点，因此从中草药中寻找高效低毒，作用专一的抗肿瘤药物有广阔的发展前景。

中药灵芝是多孔菌科灵芝属真菌植物赤芝[Ganoderma lucidum(Leyss.ex Fr.)Karst]或紫芝[Ganoderma japonicum(Fr.) Lloyd]的干燥子实体。性温、味甘，具有补中益气、滋补强壮、扶正固本的功效，临床上常用于肿瘤的治疗或辅助治疗。对于灵芝抗肿瘤有效成分的研究，主要针对灵芝多糖和灵芝三萜类成分。抗肿瘤研究结果表明，灵芝三萜对多种肿瘤细胞的生长和转移都有抑制作用。对灵芝三萜类成分的研究在20世纪八十年代达到了高潮，目前已经有150多种灵芝三萜类成分被分离鉴定，我们在针对灵芝抗肿瘤作用的有效成分研究中，分离鉴定了一个新的三萜类化合物，命名为5α-lanosta-7,9,25-triene-24α, 26-dihydroxy-3-one。药理学实验表明，该化合物具有抗肿瘤活性。针对该化合物经过试验，确定了合理的制备方法。

发明内容

本发明的目的是提供一种从灵芝中分离出的具有抗肿瘤作用的新化合物——灵芝三萜（5α-lanosta-7,9,25-triene-24α, 26-dihydroxy-3-one）。

本发明的另一个目的在于提供制备该化合物方法。

本发明的再一目的在于提供该化合物在制备治疗肿瘤药物中的应用。

本发明的目的是这样实现的，本发明所述的一种结构式（Ⅰ）的化合物，其化学结构式如下：

（Ⅰ）。

本发明上述的化合物的制备方法，包括以下步骤：

A）将灵芝用醇或醇溶液提取一次或2次以上，过滤，收集滤液，再减压浓缩干燥，获得醇提取物；

B）将醇提取物加水，以石油醚萃取脱脂后，再以乙酸乙酯萃取，获得的乙酸乙酯萃取液再以pH 8-12碱性水溶液萃取，取乙酸乙酯相蒸干，获得粗品；

C）将获得的粗品进行色谱分离纯化，得到纯的式（Ⅰ）化合物。

上述步骤C）的粗品进行色谱分离纯化的步骤包括如下：1）将粗品在硅胶上进行柱层析，用石油醚-乙酸乙酯梯度洗脱，获得石油醚-乙酸乙酯的体积比为1:1的洗脱物；2）取石油醚-乙酸乙酯的体积比为1:1的洗脱物经制备型高效液相色谱分离，甲醇-水梯度洗脱，从甲醇-水的体积比为85:15的洗脱部位得到纯的化合物（1）。

上述pH 8-12碱性水溶液采用饱和NaHCO₃水溶液。

本发明上述结构式（Ⅰ）的化合物或其衍生物在制备治疗肿瘤药物中的应用。

所述的肿瘤为人慢性粒细胞白血病细胞株K562、人髓系白血病细胞株HL60、人口腔表皮样癌细胞株KB、人食管癌细胞株OE-19或人结肠癌细胞株SW620。

本发明含有治疗有效量的结构式（Ⅰ）的化合物或其衍生物的药物组合物。

其中结构式（Ⅰ）的化合物和/或其衍生物的含量大于50%以上，尤其90%以上。

本发明含有治疗有效量的结构式（Ⅰ）的化合物或其衍生物的药物组合物在制备治疗肿瘤药物中的应用。