[发明专利]一种用于分析依鲁替尼及依鲁替尼制剂有关物质的HPLC方法以及这些杂质做参比标准的用途

权利要求书

1.检测式I的依鲁替尼或其溶剂化物，或含有依鲁替尼的药物的样品纯度的方法，包括通过色谱法测定样品中的杂质，所述杂质选自化合物A-H中的一种或多种，

其中依鲁替尼为1-[(3R)-3-[4-氨基-3-(4-苯氧基苯基)-1H吡唑并[3，4-d]嘧啶-1-基]-1-哌啶基]-2-丙烯-1-酮，结构如式I所示：

化合物A为(R)-1-(3-(4-氨基-3-(4-苯氧基苯基)-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-1-基]哌啶-1-基)-3-氯丙基-1-酮，并具有以下结构：

化合物B为(R)-8-(1-丙烯酰基哌啶-3-基)-10-(4-苯氧基苯基)-3，4-二氢吡唑并[4，3-e]嘧啶并[1，2-c]嘧啶-2(8H)-酮，并具有以下结构：

化合物C为(R)-1-3-(4-氨基-3-(4-苯氧基苯基)-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-1-基]哌啶-1-基)-乙酮，并具有以下结构：

化合物D为(R)-4-(3-(4-氨基-3-(4-苯氧基苯基)-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-1-基)-哌啶-1-羰基)戊烯-4-酸，并具有以下结构：

化合物E为1-((R)-1-丙烯酰基哌啶-3-基)-4-氨基-3-(4-苯氧基苯基)-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-1-氧化物，并具有以下结构：

化合物F为1，3-二((R)-3-(4-氨基-3-(4-苯氧基苯基)-1H-吡唑[3，4-d]嘧啶-1-基)哌啶-1-基)丙烷-1-酮，并具有以下结构：

化合物G为1-((R)-3-(4-((3-((R)-3-(4-氨基-3-(4-苯氧基苯基)-1H-吡唑[3，4-d]嘧啶-1-基)哌啶-1-基)-3-氧代丙基)氨)-3-(4-苯氧基苯基)-1H-吡唑[3，4-d]嘧啶-1-基)哌啶-1-基)丙基-2-烯-1-酮，并具有以下结构：

化合物H为(R)-1-(3-(4-氨基-3-(4-苯氧基苯基)-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-1-基)-哌啶-1-基)-丙基-1-酮，并具有以下结构：

其中所述方法包括如下步骤：

(1)将依鲁替尼或其溶剂化物或含有依鲁替尼的药物溶解在溶剂中以制备样品溶液；

(2)将化合物A～H中任何一种或多种溶解在溶剂中以制备参比标准溶液；

(3)对样品溶液和参比标准溶液实施色谱技术；以及

(4)通过参照该参比标准溶液中化合物A-H的一种或多种，测定依鲁替尼或其溶剂化物或含有依鲁替尼的药物中化合物A～H中的任何一种或多种的存在，其中所述色谱法为梯度HPLC法，在所述梯度HPLC方法中，流动相包括含缓冲溶液A和有机溶剂B的组合，所述缓冲溶液A为用醋酸调节过pH的醋酸铵水溶液，所述有机溶剂B为乙腈，其中所述色谱法使用的固定相为十八烷基硅烷键合硅胶，

其中梯度HPLC方法中，流动相包含如下的梯度设计：

其中醋酸铵存在的浓度为0.001M至1.0M，缓冲溶液A的pH为3.8～5.8。

2.权利要求1的方法，其中所述溶剂化物为水合物。

3.权利要求1的方法，其中所述梯度HPLC为与LC-MS相容的HPLC方法。

4.权利要求1的方法，其中醋酸铵存在的浓度为0.02M至0.08M。

5.权利要求1的方法，其中醋酸铵存在的浓度为0.02M至0.05M。

6.权利要求1的方法，其中醋酸铵存在的浓度为0.03M。

7.权利要求1的方法，其中缓冲溶液A的pH为4.0～5.5。

8.权利要求1的方法，其中缓冲溶液A的pH为4.0～5.0。

9.权利要求1的方法，其中缓冲溶液A的pH为4.3～4.7。

10.权利要求1-9任一项的方法，其中所述HPLC方法在20～40℃的温度下进行。

11.权利要求1-9任一项的方法，其中所述HPLC方法在25～40℃的温度下进行。