[发明专利]一种用于分析依鲁替尼及依鲁替尼制剂有关物质的HPLC方法以及这些杂质做参比标准的用途

说明书

技术领域

本发明属于药物合成领域。具体地，本发明涉及依鲁替尼(1-[(3R)-3-[4-氨基-3-(4-苯氧基苯基)-1H吡唑并[3，4-d]嘧啶-1-基]-1-哌啶基]-2-丙烯-1-酮)制备过程中出现的杂质及对依鲁替尼制剂进行分析的方法。

背景技术

Ibrutinib由美国Celera Genomics公司于2007年首先研制，后转让给加州的Pharmacyclics公司开发，2011年强生公司的子公司杨森制药(Jassen)参与合作开发。目前尚无标准的中文译名，因此本申请人在此将其音译为“依鲁替尼”。依鲁替尼的化学名称为：1-[(3R)-3-[4-氨基-3-(4-苯氧基苯基)-1H吡唑并[3，4-d]嘧啶-1-基]-1-哌啶基]-2-丙烯-1-酮，结构式为：

专利WO201384572A公开了对依鲁替尼的化学纯度进行了HPLC分析。按照该专利实施例8的方法对依鲁替尼粗品(实施例2中制备的未经异丙醇重结晶的)进行分析，所使用的高效液相色谱仪(HPLC)为Shimadzu LC-20A，PDA检测器(购自日本岛津公司)，结果如图1所示，其中图1中的最高峰为依鲁替尼的峰。由图1可知，该专利的分析方法存在如下弊端：

(1)依鲁替尼粗品中含有的杂质(该方法下保留时间约为：19.554min)对依鲁替尼主成分峰有干扰，二者分离度不符合ICH Q3A中对于有关物质方法学验证项下对专属性的要求，即杂质与主成分之间的分离度小于2.0；

(2)该分析方法运行时间较长，单针运行时间为60min；

(3)该方法杂质的计算方法为面积归一化法，由于各杂质结构不同，在拟定的检测波长下，紫外吸收情况是不同的，因此，面积归一化法并不能准确测定出各杂质在最终产品中的真实含量。

(4)并没有对依鲁替尼中的特定杂质进行定性分析。

综上所述，现有技术的检测结果并不能真实反应药物的质量。

发明内容

本发明提供了新的、可替换的方法，用于依鲁替尼和依鲁替尼制剂有关物质的定性、定量分析，并用这些杂质作为参比标准或对照品来进行杂质的定量和定性分析。本发明的另一个目的是提供参比标准或对照品，用于检测在制备依鲁替尼的过程中形成的称为A～H的杂质。

本发明提供的用于分析依鲁替尼或依鲁替尼制剂中有关物质的HPLC方法，其中，流动相包括两种或更多种液体，且液体的相对浓度随预定的梯度而变化。发明人利用8种制备和鉴定结构的杂质(称化合物A～H)用于依鲁替尼或含有依鲁替尼的药物制剂有关物质分析方法的参比标准或对照品。现有技术中尚未披露这些杂质及杂质的结构。

因此，本发明的第一个方面提供化合物A，其具有化学名：(R)-1-(3-(4-氨基-3-(4-苯氧基苯基)-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-1-基]哌啶-1-基)-3-氯丙基-1-酮，并具有以下结构：

第二个方面提供化合物B，其具有化学名：(R)-8-(1-丙烯酰基哌啶-3-基)-10-(4-苯氧基苯基)-3，4-二氢吡唑并[4，3-e]嘧啶并[1，2-c]嘧啶-2(8H)-酮，并具有以下结构：

第三个方面提供化合物C，其具有化学名：(R)-1-3-(4-氨基-3-(4-苯氧基苯基)-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-1-基]哌啶-1-基)-乙酮，并具有以下结构：

第四个方面提供化合物D，其具有化学名：(R)-4-(3-(4-氨基-3-(4-苯氧基苯基)-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-1-基)-哌啶-1-羰基)戊烯-4-酸，并具有以下结构：

第五个方面提供化合物E，其具有化学名：1-((R)-1-丙烯酰基哌啶-3-基)-4-氨基-3-(4-苯氧基苯基)-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-1-氧化物，并具有以下结构：

第六个方面提供化合物F，其具有化学名：1，3-二((R)-3-(4-氨基-3-(4-苯氧基苯基)-1H-吡唑[3，4-d]嘧啶-1-基)哌啶-1-基)丙烷-1-酮，并具有以下结构：

第七个方面提供化合物G，其具有化学名：1-((R)-3-(4-((3-((R-3-(4-氨基-3-(4-苯氧基苯基)-1H-吡唑[3，4-d]嘧啶-1-基)哌啶-1-基)-3-氧代丙基)氨)-3-(4-苯氧基苯基)-1H-吡唑[3，4-d]嘧啶-1-基)哌啶-1-基)丙基-2-烯-1-酮，并具有以下结构：