[发明专利]一种用于多种蛋白酶活性长时间实时并行检测的纳米探针

权利要求书

1.一种用于多种蛋白酶活性长时间实时并行检测的纳米探针，其特征在于，利用量子点(2)和纳米金颗粒(4)分别作为供体和受体，通过底物多肽(3)连接量子点(2)和纳米金颗粒(4)形成能量转移供受体对，且用穿透肽(1)修饰供受体对，即形成以“穿透肽-量子点-底物多肽-纳米金颗粒”为结构的蛋白酶活性检测探针；使用不同发射光谱的量子点(2)分别结合含有不同酶切位点的底物多肽(3)，得到检测不同蛋白酶的多种探针；当这些探针均进入活细胞内部时，在同一种波段的激发光下即可实现多种蛋白酶的并行检测；

所述穿透肽(1)为细胞生长因子EGF，其一端用生物素修饰；

所述量子点(2)表面用链霉亲和素修饰；

所述底物多肽(3)包含待测蛋白酶水解的位点，底物多肽(3)的结构为biotin-GRRG-XXXX-GGRRC，其中biotin代表用于偶联的生物素，中间段未知氨基酸序列-XXXX-提供酶解位点；

所述底物多肽(3)中，头尾两端氨基酸序列GRRG-与-GGRRC均为D型氨基酸；中间段未知氨基酸序列-XXXX-为L型天然氨基酸；

所述纳米金颗粒(4)，直径范围为2nm-15nm。