[发明专利]鲍曼不动杆菌假定蛋白A1S_1523的蛋白及制备方法和应用有效
申请号: | 201510197921.6 | 申请日: | 2015-04-24 |
公开(公告)号: | CN104877019B | 公开(公告)日: | 2018-06-08 |
发明(设计)人: | 邹全明;石云;曾浩;冯强;杨赟;蔡昌芝 | 申请(专利权)人: | 中国人民解放军第三军医大学 |
主分类号: | C07K14/22 | 分类号: | C07K14/22;C07K19/00;C12N15/31;C12N15/62;C12N15/70;C12N1/21;C07K16/12;A61K39/02;A61P31/04 |
代理公司: | 重庆志合专利事务所(普通合伙) 50210 | 代理人: | 胡荣珲 |
地址: | 400038 重*** | 国省代码: | 重庆;50 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 鲍曼不动杆菌 重组蛋白 制备方法和应用 蛋白 单价亚单位疫苗 基因工程重组 免疫保护效果 重组蛋白表达 氨基酸序列 亚单位疫苗 诊断试剂盒 动物实验 分离纯化 高效安全 检测试剂 联合疫苗 疫苗研究 感染 成熟肽 亚单位 佐剂 制备 疫苗 融合 防治 应用 | ||
1.一种鲍曼不动杆菌A1S_1523重组蛋白,其特征在于:包含A1S_1523成熟肽,所述成熟肽的氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示,所述重组蛋白的氨基酸序列如SEQ ID NO.3所示。
2.编码权利要求1所述的A1S_1523重组蛋白的多核苷酸。
3.权利要求1所述的A1S_1523重组蛋白的制备方法,其特征在于,包括以下步骤:
1)设计PCR的引物如下:
正向引物
5'-CGCGGATCCGACTATAAAATTGATCCAACACA -3'
反向引物
5'-TTATGCGGCCGCTTATTTTTTAGCTGCACTAGCC -3';
2)使用步骤1)设计的引物通过PCR扩增出编码所述成熟肽的目的基因片段;
3)步骤2)所得的基因片段克隆至含有GST标签的表达载体,然后转化至宿主菌;
4)诱导转化后的宿主菌表达融合蛋白,所述融合蛋白由GST标签蛋白融合于所述A1S_1523成熟肽的N端形成;
5)纯化融合蛋白,PreScission蛋白酶酶切融合蛋白,得到A1S_1523重组蛋白。
4.一种表达载体,其特征在于:包含编码权利要求1所述重组蛋白的多核苷酸。
5.根据权利要求4所述的表达载体,其特征在于:所述表达载体是pGEX-6P-2。
6.一种宿主菌,其特征在于:包含权利要求4所述的表达载体。
7.根据权利要求6所述的宿主菌,其特征在于:所述宿主菌是大肠杆菌XL1-Blue。
8.抗权利要求1所述的A1S_1523重组蛋白的抗体。
9.权利要求1所述的A1S_1523重组蛋白在制备预防或治疗鲍曼不动杆菌感染的药物中的应用。
10.权利要求1所述的A1S_1523重组蛋白在制备鲍曼不动杆菌检测试剂盒中的应用。
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