[发明专利]一种快速预警烟草及烟草制品霉变的方法

说明书

技术领域

 本发明属于烟草及烟草制品霉变快速预警技术领域，具体涉及一种快速预警烟草及烟草制品霉变的方法。

背景技术

霉变对卷烟产品质量和安全性产生严重影响，烟草及烟草制品在醇化储存、加工运输中，若环境温湿度条件适宜，细菌或真菌微生物会大量生长，使烟草及烟草制品发生霉变，产生霉味、异味。随着霉变程度加重，使烟草及烟草制品品质降低直至失去使用价值，霉菌产物的致癌毒性还会危害消费者健康。烟草霉菌常见的菌株类型有黑曲霉Aspergillus niger (AN)、华丽曲霉Aspergillus ornatus (AO)、产黄青霉Pencillium chrysogenum (PC)、匍枝根霉Rhizopus stolonifer(RS)等。

2004年，菲莫公司的N. K. Meruva采用闭路溶出气相色谱/飞行时间质谱法（CLSA-GC/TOF-MS），测定了几种常见烟草霉菌菌株在代谢过程产生的微生物挥发性有机化合物（MVOCs），主要包括1-辛烯-3-醇、2-辛烯-1-醇、2-甲基-1-丁醇、3-甲基-1-丁醇、1-辛烯和2 -戊酮等，且1-辛烯-3-醇、1-辛烯是大多菌株都可产生的MVOCs种类。因此，这些MVOCs可用做烟草霉变的特征标志物。

1-辛烯-3-醇别名蘑菇醇，分子式为C₈H₁₆O，分子量为128.21，为无色至黄色液体，不溶于水，溶于乙醇等有机熔剂，沸点84-85 °C/25 mmHg(lit.)，相对密度0.83 g/mL（25 °C(lit.)），折光指数为1.437（n20/D(lit.) ）。

1-辛烯-3-醇天然存在于番茄、蘑菇、葡萄、香蕉、甜瓜、草莓等植物中。具有蘑菇香、青香、蔬菜香以及油腻的气息。用于调配蘑菇、西红柿、土豆、牛奶、坚果等食用香精。建议用量为在最终加香食品中浓度约为0.2～6mg/kg。1-辛烯-3-醇的FEMA编号为2805，FDA编号为172.515，CoE编号为72，中国GB 2760－1996批准其为允许使用的食品香料。

现有的烟草霉变监测方法，有微生物学检验，如霉菌计数方法，需要5天实验周期；化学方法，如气相色谱质谱法测定霉变烟草中麦角甾醇，该方法需要对样品进行衍生化前处理；高效液相色谱-串联质谱法测定霉变烟草中麦角甾醇，该方法需要对烟草样品研磨萃取，且对仪器条件有相对较高要求，而且麦角甾醇更宜应用在烟草霉变较明显情况下，不能起到很好烟草霉变的预警作用。因此，需要开发较为快速简便的方法。

发明内容

本发明的目的在于提供一种快速预警烟草及烟草制品霉变的方法。

基于上述目的，本发明采取了如下技术方案：

一种快速预警烟草及烟草制品霉变的方法，包括如下步骤：

第一步，烟草或烟草制品霉变 ：称取0.1~0.3g烟草或烟草制品碎片，放入20mL顶空瓶中，制备系列样品，首先，对这些样品进行挥发性有机化合物分析，作为未霉变对照样品；然后将这些样品不加盖，放在恒温恒湿箱中让其霉变；

第二步，定性识别烟草或烟草制品霉变挥发性标志物：（1）每天抽样或者在前期隔一天抽样、10天以后每天抽样，使用顶空-固相微萃取-气相色谱/质谱法分析上述实验中的样品，在EI源电子能量70eV下得到全扫描模式标准谱图，扫描范围35~350amu；（2）测试柱空白、样品瓶空白，比较步骤（1）所得到的谱图，对出现差异的色谱峰进行NIST谱库检索；（3）通过上述谱图筛查，定性识别出烟草或烟草制品中霉变挥发性有机化合物中的1-辛烯-3-醇，并得到1-辛烯-3-醇的保留时间；（4）保留指数辅助定性。

进一步地，还包括第三步，1-辛烯-3-醇的定量：（1）标准工作曲线的绘制，称取0.1~0.3g未发生霉变的烟叶碎片或烟丝，加入1-辛烯-3-醇标准溶液，配制系列标准溶液，使用顶空-固相微萃取-气相色谱/质谱法分检测上述标准溶液，相色谱/质谱选择SIM扫描方式，选择离子m/z为57、43，以浓度为横坐标、响应强度为纵坐标，绘制标准工作曲线，依据工作曲线和1-辛烯-3-醇的响应强度进行定量。

较好地，所述第一步中恒温恒湿箱的温度为35℃，相对湿度为85%。