[发明专利]一种草金鱼腹鳍细胞系的构建方法

说明书

技术领域

本发明涉及细胞生物学领域，具体涉及一种草金鱼腹鳍细胞系的构建方法。

背景技术

鱼类细胞系经过多年的发展，各种淡水、海水鱼类细胞系已成为多种学科领域重要的体外研究体系，许多重要实验和新技术都需要在鱼类细胞系的基础上进行进一步研究。鱼类细胞系的应用范围日益广泛，已从最初的病毒分离、提纯、鉴定、体外繁殖扩展到环境污染物致毒机理及其监测、鱼类免疫、种质改良、资源保护等诸多领域。鱼类细胞系不但可作为在细胞生物学、鱼类病毒学、鱼类生理学、鱼类免疫学、环境毒理学、鱼类遗传学、药理学等多种学科进行基础研究的良好的体外研究体系，还可在鱼类病毒疫苗研制，环境污染物毒性检测，鱼类基因工程育种，鱼类组织胚胎研究，珍稀鱼类资源保护，天然活性物质开发等领域进行应用研究。无论在理论研究方面，还是实际应用方面，都具有深远意义。

观赏鱼的饲养在我国具有悠久的历史，其中草金鱼是我国观赏鱼中养殖量和出口规模最大的品种之一。草金鱼(Carassius auratus)隶属于鲤型目(Percoiformers)、鲤科(Sparidae)、鲫属(Carassius)。Wolf和Quimby在20世纪60年代建立了世界上第一株鱼类细胞系，即虹鳟鱼生殖腺细胞系RTG-2。目前已经报道的鱼类细胞系有300余种(Lakra W S,Swaminathan T R,Joy K P.Development,characterization,conservation and storage of fish cell lines:a review[J].Fish Physiology and Biochemistry,2011,37(1):1-20)。其中已经报道的金鱼的细胞株主要有GFSK-S1金鱼肾脏细胞系(Dicky L Y,Chow B K C,Chan C B,et al.Molecular cloning and expression studies of a prolactin receptor in goldfish(Carassius auratus)[J].Life sciences,2000,66(7):593-605)，GAKS金鱼鳞片细胞系(Akimoto K,Takaoka T,Sorimachi K.Development of a simple culture method for the tissues contaminated with microorganisms and application to establishment of a fish cell line[J].Zoological science,2000,17(1):61-63)，GFM金鱼肌肉细胞系(Rougée L,Ostrander G K,Richmond R H,et al.Establishment,characterization,and viral susceptibility of two cell lines derived from goldfish Carassius auratus muscle and swim bladder[J].Diseases of aquatic organisms,2007,77(2):127)，GH金鱼心脏细胞系(CGMCC NO.9334)，金鱼尾鳍细胞系(Hashimoto H,Toyohara H,Yokoyama Y,et al.Effects of carp serum on the growth of goldfish fin cells in early passage[J].Journal of fish biology,1997,50(1):201-207)。

细胞培养技术是生命科学领域，细胞工程、基因工程和生物医学工程主要的研究手段。鱼类细胞系的构建为鱼类病毒性疾病的病原学研究和病毒的疫苗研究提供了基础的生物学材料具有重要的研究价值。通过细胞株来鉴定和分离敏感病毒株是世界动物卫生组织Office International Des Epizooties(OIE)推荐的最有效方法，通过建立不同种类的鱼类细胞株为鱼类病毒筛选敏感细胞系提供了丰富的生物学材料。目前，已构建的金鱼细胞系如上所述，而关于草金鱼腹鳍细胞系还未见报道。

发明内容

本发明的目的是针对现有技术中的不足，提供一种草金鱼腹鳍细胞系的构建方法。

本发明的第二个目的是，提供所述细胞系的用途

为实现上述目的，本发明采取的技术方案是：

一种草金鱼腹鳍细胞系的构建方法，其特征在于，包括如下步骤：