[发明专利]桉蝙蛾白僵菌菌种的分离培养及其防治桉蝙蛾的方法

权利要求书

1.一种桉蝙蛾白僵菌菌种的分离培养方法，它包括以下步骤：

（1）采集感病的桉蝙蛾，采集桉蝙蛾疑似感染白僵菌自然死亡的虫尸；

（2）筛选病原菌，对采集的桉蝙蛾虫尸在光学显微镜下进行镜检，确定病原菌种类，选取感染白僵菌的虫尸；

（3）初培养，对所选择桉蝙蛾虫尸进行常规的表面消毒，剖切虫尸，取虫尸中间一小块组织移至PDA平板培养基上，封口后置于25℃恒温培养箱内培养7 天，然后，取上述PDA平板培养基培养长出的菌落边缘部位菌丝体移接于PDA斜面培养基上，25℃恒温箱内培养[s1] ，待斜面试管菌种长满后放入4℃冰箱保存备用；

（4）单孢纯化，采用稀释纯化法对保存在冰箱中的菌种进行单孢纯化，备用；

（5）形态学鉴定，将所获得的桉蝙蛾白僵菌菌株置于PDA+桉蝙蛾虫体组织培养基上培养，其形态与球孢白僵菌最相似，初步确认为桉蝙蛾白僵菌。

2.一种桉蝙蛾的防治方法，利用权利要求1的桉蝙蛾白僵菌菌种培养出大量分生孢子，然后进行防治，它包括以下步骤：

（1）取桉蝙蛾白僵菌菌种置于PDA斜面培养7-15天，让其长出大量分生孢子；

（2）将培养好的分生孢子置入一个灭过菌的盛有0.05% -吐温80无菌水的容器中；

（3）在液体快速混合器上充分振荡，3层灭菌的纱布过滤；

（4）将过滤所得分生孢子配制浓度为1.0×10⁷孢子·mL^-1的悬浮液；

（5）于桉蝙蛾幼虫期用注射器将孢子悬浮液注入桉树上的桉蝙蛾蛀道内，或拆开木屑包对蝙蛾蛀道喷雾，每个蛀道注射或喷雾1ml孢子悬浮液。