[发明专利]一株具有高胆酸盐水解酶活性的嗜酸乳杆菌及其应用

说明书

本发明涉及一株具有高胆酸盐水解酶活性的嗜酸乳杆菌及其应用，所述的嗜酸乳杆菌命名为KLDS1015，分类命名为嗜酸乳杆菌(Lactobacilus acidophilus)，微生物保藏号为CGMCC No.10436。本发明筛选出的嗜酸乳杆菌具有较高的胆酸盐水解酶活性，其降胆固醇能力也很强，可广泛用于食品工业领域，为进一步研究嗜酸乳杆菌的降胆固醇机理和开发具有降胆固醇功能的乳酸菌制品奠定了基础。

技术领域

本发明涉及一株具有高胆酸盐水解酶活性的嗜酸乳杆菌，以及该菌株在胆固醇去除中的应用，属于食品生物技术领域。

背景技术

随着科技的进步，人民膳食结构发生了改变，饮食营养越来越丰富，但随之而来的负面作用也越来越严重，尤其是冠心病、高血压等心血管疾病的发病率不断增长。人体血清中胆固醇含量的升高被认为是导致许多心血管疾病的重要因素。血清中胆固醇含量增加1％，，患有高血压等心血管疾病的概率会增加3％。大量国内外研究表明，血清中胆固醇含量的高低直接影响到人类的健康，因此，抑制体内胆固醇的合成、促进胆固醇的分解代谢已成为众多专家学者的研究课题。

益生菌是一种对人体健康有益的活体微生物，它包括植物乳杆菌、嗜酸乳杆菌、干酪乳杆菌、双歧杆菌、嗜热链球菌、保加利亚乳杆菌、瑞士乳杆菌等。他们能促进乳糖消化，增强免疫调节，对肠道致病菌产生拮抗作用，调节血脂，和降低胆固醇含量等功效，常被用于乳品、肉品、水产品工业方面。近年来，大量研究证明乳酸菌具有降低血清中胆固醇的功效。Shimada等人发现在人体肠道中存在着许多细菌，他们可以降解结合胆盐，从而促进了体内胆固醇的分解代谢。因此，胆酸盐水解酶走进了人们的视野，对益生菌降胆固醇的作用机理具有重要的意义。

BSH(胆盐水解酶)是微生物生长代谢过程中产生的一种代谢产物，主要由乳酸菌产生，能将结合态甘氨酸胆盐、牛磺酸胆盐水解成游离胆酸和氨基酸残基。BSH是一种胞内酶，属于甘氨酸水解酶家族，N-端是半胱氨酸残基，在氨基酸序列中的第一位半胱氨酸的巯基是BSH分解的基础，研究表明，BSH中这个半胱氨酸残基的位点是十分保守的。BSH可以分别通过固醇类核团和氨基酸集团识别胆酸，因此具有底物特异性，导致不同种属的菌水解结合胆盐的类型不同，能力也各不相同。

乳酸菌中的胆酸盐水解酶，除了具有降低血清中胆固醇的作用外，还能维护肠道菌群平衡，抵抗胆盐毒性，因此，筛选出具有高胆酸盐水解酶活性的乳酸菌是非常必要的。本发明筛选出的嗜酸乳杆菌具有较高的胆酸盐水解酶活性，降胆固醇能力也很强，可广泛用于食品工业领域。

发明内容

本发明通过茚三酮显色法筛选出一株具有高胆酸盐水解酶活性的嗜酸乳杆菌，命名为KLDS1015，分类命名为嗜酸乳杆菌(Lactobacilus acidophilus)，该菌株是从传统乳制品中分离的乳酸菌中筛选出的，于2015年01月26日保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，微生物保藏号为CGMCC No.10436，保藏地址为北京市朝阳区北辰西路1号院3号，中国科学院微生物研究所。

本发明菌株KLDS1015的16SrDNA序列与Lactobacilus acidophilus序列相似性达95％以上，根据16SrDNA序列分析，菌株KLDS1015被鉴定为嗜酸乳杆菌(Lactobacilusacidophilus)，其16SrDNA序列如核苷酸序列中SEQ ID NO：1所示，其以16SrDNA全序列为基础的系统发育树如图1所示。

本发明的嗜酸乳杆菌(Lactobacilus acidophilus)KLDS1015具有较高的胆酸盐水解酶活力，其以牛磺脱氧胆酸盐为底物下的比酶活可达到63.71U/mg，同时该菌株具有较高的降胆固醇的能力，其胆固醇去除率达到了57.9％。

因此，本发明进一步地提供了嗜酸乳杆菌(Lactobacilus acidophilus)KLDS1015在胆固醇去除中的应用；及