[发明专利]疏水作用层析提纯口蹄疫灭活病毒抗原的方法

权利要求书

1.一种根据疏水相互作用原理提纯口蹄疫灭活病毒抗原的方法，其特征在于，所述方法包含如下步骤：将含有口蹄疫灭活病毒抗原的细胞培养液调节电导为50～150mS/cm，pH为7.2～9.0，通过口蹄疫灭活病毒抗原表面的疏水基团与表面基团为丁基的疏水作用层析填料上的丁基疏水基团之间的相互作用，实现口蹄疫灭活病毒抗原在层析填料上的吸附，从而与原料溶液中不发生吸附和吸附较弱的杂质分开，采用电导为5-150mS/cm，pH 7.2～9.0的洗脱条件把吸附在层析柱上的口蹄疫灭活病毒抗原洗脱下来，达到提纯的目的；色谱操作包括疏水作用层析填料的平衡、进料、淋洗、洗脱和填料的再生，平衡和淋洗所用的溶液的电导为30～300mS/cm，pH 7.2～9.0；其中，调节所述细胞培养液的电导和所述平衡、淋洗的电导所用的盐为硫酸铵、氯化钠或磷酸盐。

2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，疏水作用层析的模式是将疏水作用层析填料加入到含有口蹄疫灭活病毒抗原的细胞培养液中，然后再将填料装入层析柱中进行层析操作，或者是将含有口蹄疫灭活病毒抗原的细胞培养液直接加入到装有疏水作用层析填料的层析柱中进行层析操作。

3.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，细胞培养液中的口蹄疫灭活病毒抗原146S的浓度为2-100μg/ml；为缩短层析操作时间，采用超滤浓缩的方法减少细胞培养液的体积。

4.根据权利要求3所述的方法，其特征在于，超滤浓缩所用的超滤膜截留分子量为50～300kDa，超滤时膜表面的切向流速为10～100cm/s，操作压力在0.3MPa以下。

5.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，平衡和淋洗所用的溶液的电导为50～150mS/cm。

6.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，再生液采用0.5～1M NaOH或20～40wt％异丙醇溶液。