[发明专利]一种垂体后叶激素的纯化方法有效
申请号: | 201510215900.2 | 申请日: | 2015-04-30 |
公开(公告)号: | CN104829694B | 公开(公告)日: | 2018-12-11 |
发明(设计)人: | 黄臻辉;江文涛;汪雅雯;丁金国 | 申请(专利权)人: | 上海上药第一生化药业有限公司 |
主分类号: | C07K7/16 | 分类号: | C07K7/16;C07K1/34 |
代理公司: | 上海容慧专利代理事务所(普通合伙) 31287 | 代理人: | 于晓菁 |
地址: | 200240 *** | 国省代码: | 上海;31 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 垂体 激素 纯化 方法 | ||
1.一种垂体后叶激素的纯化方法,其包括下述步骤:
(1)将垂体后叶激素原液与缓冲液混合,所述的缓冲液的pH值为3.0~5.0;
(2)采用超滤膜进行超滤,收集截留液;所述的超滤膜为截留相对分子量为2kDa的超滤膜;所述分子量为2kDa的超滤膜来源于德国赛多利斯公司的Hydrosart超滤膜;
(3)将截留液用水稀释,加入酸调节溶液pH值至1.0~2.0;
(4)采用超滤膜进行反超滤,收集超出液,即可;所述的超滤膜为截留相对分子量为5kDa的超滤膜;所述分子量为5kDa的超滤膜来源于德国赛多利斯公司的Hydrosart超滤膜;
所述的垂体后叶激素原液通过下述步骤制得:脑垂体丙酮浸泡→剥取后叶丙酮浸泡→干燥→粉碎→丙酮处理→干燥→粉碎→酸提取→活性炭脱色→过滤→得垂体后叶激素原液。
2.如权利要求1所述的纯化方法,其特征在于,步骤(1)中所述的缓冲液为醋酸钠-醋酸缓冲液或醋酸铵-醋酸缓冲液。
3.如权利要求1所述的纯化方法,其特征在于,所述的垂体后叶激素原液与缓冲液的体积比为(0.5~5):1。
4.如权利要求1所述的纯化方法,其特征在于,步骤(1)中,所述的缓冲液的浓度为10mmol/L~100mmol/L。
5.如权利要求1所述的纯化方法,其特征在于,步骤(3)中,所述的酸为盐酸、硫酸和磷酸中的一种或多种。
6.如权利要求1所述的纯化方法,其特征在于,步骤(2)中,超滤的时间以超出液体积达到垂体后叶激素超滤起始体积的70%~90%时为止。
7.如权利要求1所述的纯化方法,其特征在于,步骤(4)中,反超滤的时间以超出液体积达到垂体后叶激素反超滤起始体积的70%~90%时为止。
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