[发明专利]一种高产胞外多糖的乳酸菌BL21及制备方法和应用有效

专利信息
申请号: 201510217639.X 申请日: 2015-04-30
公开(公告)号: CN104894005B 公开(公告)日: 2018-05-22
发明(设计)人: 方曙光;马凯;姜甜;夏九学 申请(专利权)人: 江苏紫石微康生物科技有限公司
主分类号: C12N1/20 分类号: C12N1/20;C12P19/04;A61K8/73;A61K31/715;A61Q19/02;A61Q17/04;A61P17/00;C12R1/01
代理公司: 上海思微知识产权代理事务所(普通合伙) 31237 代理人: 张佩璇
地址: 215200 江苏*** 国省代码: 江苏;32
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摘要:
搜索关键词: 一种 高产 多糖 乳酸菌 bl21 制备 方法 应用
【权利要求书】:

1.一种产胞外多糖的乳酸菌,其特征在于,名称为BL21,属于长双歧杆菌(Bifidobacterium longum),保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心,保藏编号为CGMCC No.10452,保藏日期为2015年1月27日。

2.一种如权利要求1所述长双歧杆菌BL21制备胞外多糖的方法,其特征在于,包含以下步骤:将权利要求1所述长双歧杆菌BL21接种到胞外多糖培养基中,胞外多糖培养基中各组分重量百分比:0.5%的果糖、1.2%的蔗糖、0.5%低聚果糖、0.5%低聚半乳糖和余量的水,先于37℃下静置培养12小时,再降低温度至30℃培养36小时;

上述培养液使用角转子离心机处理,6000rpm离心20分钟,收集第一上清液,然后向第一上清液中加入第一上清液重量2%的卡拉胶水溶液,所述卡拉胶水溶液是经灭菌后的卡拉胶溶解于水中获得,其中卡拉胶含量为0.2wt%,充分混匀后,加入1/10体积的氯仿,震荡使混合均匀后6000rpm离心15分钟,使其分层,液体分为3层,上层为第二上清液,中层为析出的蛋白质层,底层为氯仿;

收集第二上清液,加入2倍体积的95%酒精,搅拌,胞外多糖呈絮状析出,用200目网过滤进行收集;

将收集的胞外多糖放置在1倍体积的80%酒精溶液中浸泡4小时,取出并挤去酒精,放置在60℃烘箱中干燥处理4小时,获得块状的胞外多糖。

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