[发明专利]抗人ROR1单克隆抗体及其制备方法与应用

权利要求书

1.一种抗ROR1的人源化单克隆抗体，该抗体具有重链可变区和轻链可变区，其中：该抗体的重链可变区的氨基酸序列如SEQ ID NO：1所示，轻链可变区的氨基酸序列如SEQ ID NO：2所示。

2.根据权利要求1所述的抗体，该抗体的重链恒定区为人IgG1-Fc恒定区，轻链恒定区为人κ链恒定区。

3.根据权利要求1所述的抗体，该抗体的重链和轻链的氨基酸序列分别如SEQ ID NO：4和SEQ ID NO：6所示。

4.一种多核苷酸，所述多核苷酸编码权利要求1～3任一项所述的抗体的重链可变区和/或轻链可变区，或者编码权利要求1～3任一项所述的抗体的重链和/或轻链。

5.一种分泌表达权利要求1～3任一项所述的抗ROR1的人源化单克隆抗体的细胞株。

6.根据权利要求5所述的分泌表达抗ROR1的人源化单克隆抗体的细胞株，其是按照以下方法制备得到的：

将带有编码权利要求1～3任一项所述的抗体的重链的抗体基因的表达载体、带有编码权利要求1～3任一项所述的抗体的轻链的抗体基因的表达载体分别转入大肠杆菌DH5α菌株，进行扩增培养，抽提纯化质粒DNA；

将所得纯化的质粒DNA转染CHO细胞；

转染的CHO细胞使用嘌呤霉素进行筛选，并在半固体选择培养基上进行稀释，使用ClonePix FL进行克隆挑选。

7.根据权利要求6所述的细胞株，其中，所述分泌抗ROR1的人源化单克隆抗体的细胞株为保藏编号为CGMCC No.10583的细胞株。

8.权利要求1～3任一项所述的抗体的制备方法，该方法包括：

培养权利要求5～7任一项所述的细胞株，收集细胞培养液，离心，上清液经0.45μm过滤后进Protein A柱亲和纯化，得到抗ROR1的人源化单克隆抗体。