[发明专利]人类CYP2D6和SULT1A1基因多态性检测试剂盒

权利要求书

1.一种CYP2D6和SULT1A1基因多态性检测试剂盒，该试剂盒包括PCR缓冲液，HotStart Taq酶，UNG酶，2组特异性引物，2组特异性探针和内标系统，其中，所述2组特异性引物序列分别为SEQ ID NO:1、SEQ ID NO:2、SEQ ID NO:3与SEQ ID NO:4；SEQ ID NO:5、SEQ ID NO:6与SEQ ID NO:7。

2.如权利要求1所述的CYP2D6和SULT1A1基因多态性检测试剂盒，其特征在于，所述2组特异性探针序列分别为SEQ ID NO:8与SEQ ID NO:9，SEQ ID NO:10与SEQ ID NO:11，且所述特异性探针5’端修饰有FAM或VIC，3’端修饰有NFQ-MGB。

3.如权利要求1或2所述的CYP2D6和SULT1A1基因多态性检测试剂盒，其特征在于，所述内标系统包含内标引物和内标探针，所述内标引物序列为SEQ ID NO:12和SEQ ID NO:13，所述内标探针序列为SEQ ID NO:14。

4.如权利要求3所述的CYP2D6和SULT1A1基因多态性检测试剂盒，其特征在于，所述内标探针5’端修饰有ROX，3’端修饰有BHQ2。

5.如权利要求1至4任一项所述的CYP2D6和SULT1A1基因多态性检测试剂盒，其特征在于，所述检测试剂盒含有阳性对照液和空白对照液，所述阳性对照液含有4种质粒DNA混合液，所述4种质粒DNA分别含有2种不同的CYP2D6等位基因和2种不同的SULT1A1等位基因，所述空白对照为Tris-HCl缓冲液。

6.一种用于检测CYP2D6和SULT1A1基因多态性的方法，该方法包括以下步骤：

(1)设计并筛选含有CYP2D6和SULT1A1的检测探针，ARMS引物，通用引物；

(2)使用从非细胞体系或细胞体系中提取的基因组DNA作为模板DNA；

(3)进行实时荧光定量PCR扩增：每个样本的CYP2D6基因多态性和SULT1A1基因多态性检测分2管进行PCR反应。

7.一种用于检测CYP2D6和SULT1A1基因多态性的方法，该方法包括以下步骤：

(1)设计并筛选特异性扩增与检测CYP2D6和SULT1A1基因多态性的引物组合和探针组合；制备如权利要求1至5任选一项所述试剂盒；

(2)获得待测样品基因组DNA；

(3)进行荧光定量PCR扩增：每个样本分两个反应管分别检测CYP2D6和SULT1A1基因的多态性，每管中加入特异性引物组和探针组、PCR反应缓冲液、Taq酶、UNG酶、内标系统，将上述获得的基因组DNA先后取相同的量加入所述2个反应管中并同时进行PCR反应。