[发明专利]一种尿微量白蛋白检测方法在审
申请号: | 201510227240.X | 申请日: | 2015-05-02 |
公开(公告)号: | CN105301257A | 公开(公告)日: | 2016-02-03 |
发明(设计)人: | 王贤俊;郑蓓蕾;郭二豪;江新涛 | 申请(专利权)人: | 王贤俊 |
主分类号: | G01N33/68 | 分类号: | G01N33/68 |
代理公司: | 暂无信息 | 代理人: | 暂无信息 |
地址: | 325000 浙江省*** | 国省代码: | 浙江;33 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 微量 白蛋白 检测 方法 | ||
1.本发明提供一种尿微量白蛋白(mAlb)检测方法,所述检测方法基于胶乳增强免疫比浊法,为液体双试剂,包括试剂R1与R2,所述试剂R1为反应剂,试剂R2为含有白蛋白免疫胶乳颗粒的溶液,其特点在于应用化学方法交联,通过水溶性碳化二亚胺(EDC)与N-羟基琥珀酰亚胺(NHS)使羊抗人白蛋白抗体(也称羊抗人mAlb抗体)与羧化聚苯乙烯胶乳共价交联,制备mAlb抗体胶乳试剂。
2.根据权利要求1所述化学交联方法制备mAlb抗体胶乳试剂,其特征在于所用的羧化聚苯乙烯胶乳粒径为200nm。
3.根据权利要求1所述化学交联方法制备mAlb抗体胶乳试剂,其特征在于羧化聚苯乙烯胶乳与羊抗人mAlb抗体共价交联过程中分别添加水溶性碳化二亚胺(EDC)与N-羟基琥珀酰亚胺(NHS)。
4.根据权利要求1所述的化学交联法制备mAlb抗体胶乳试剂,其特征在于包括如下步骤:
1)配制0.01mol/L,PH7.2磷酸盐缓冲液(PBS),0.01mol/L,PH7.6磷酸盐缓冲液(PBS)。
2)在含有EDC与NHS的缓冲液中,将羊抗人mAlb抗体交联于胶乳微粒上,获得mAlb抗体胶乳试剂。
5.根据权利要求4中步骤2)所述,其特征在于室温反应要求温度为20-25℃,恒温水浴要求温度为37℃。
6.根据权利要求3中步骤2)所述,其特征在mAlb抗体胶乳试剂以0.1%(重量体积比)叠氮钠溶液为防腐剂。
7.根据权利要求1所述,其特征在于样品中mAlb的计算公式为:
样品中mAlb(mg/L)=Cs×ΔAT/ΔAS
式中:ΔAT以空白管吸光度为对照的样品管吸光度;
ΔAS以空白管吸光度为对照的校准管吸光度;
Cs校准液中mAlb的浓度。
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