[发明专利]一种苦参药材中苦参碱和氧化苦参碱的薄层色谱鉴别法

说明书

技术领域

本发明涉及到中药材鉴别技术领域，具体涉及用一种改进的薄层色谱鉴别法同时快速准确对苦参药材中两种特征成分苦参碱和氧化苦参碱进行鉴别的方法。

背景技术

苦参为常用中药，来源于豆科植物苦参Sop hor a f lavesens Ait.的干燥根，具清热燥湿，杀虫功效，主要含生物碱成分，其中苦参碱(matrine)为其有主要有效成分之一，具有抗肿瘤，平喘和抑菌作用；氧化苦参碱具有抗肿瘤，平喘等作用。因此鉴定苦参药材中苦参碱、氧化苦参碱是苦参药材质量控制的方法的关键。

2010版《中华人民共和国药典一部》对苦参中苦参碱和氧化苦参碱的薄层色谱鉴别，样品处理方法为：苦参药材粉末0.5g，加浓氨试液0.3ml，三氯甲烷25ml，放置过夜，过滤，滤液蒸干，残渣加三氯甲烷0.5ml使溶解；所用展开板为2％氢氧化钠溶液制备的硅胶G薄层板；展开剂以甲苯一丙酮一甲醇(8:3:0.5)与甲苯一乙酸乙酯一甲醇一水(2:4:2:1)10℃以下放置的上层溶液进行2次展开，显色剂为依次喷以碘化铋钾试液和亚硝酸钠乙醇试液。此法操作过程过于繁琐，费时，尤其是色谱结果不理想；用该法制备的薄层板，粘着力较差，有鼓包脱板现象，且双相展开剂二次展开操作较麻烦，拖尾现象严重；以碘化铋钾试液作为显色剂，显色快，但显现的斑点消失太快，不利于保持影像资料。此外，由于薄层色谱鉴别长时间测定结果存在偏差以及显色不明显等缺陷而实际应用效果不佳。

发明内容

本发明通过对苦参中苦参碱和氧化苦参碱鉴别方法的探索改变，提供了一种较为精确、快速、简便、无测定偏差以及显色持久明显的效果改进的苦参药材中苦参碱和氧化苦参碱的薄层色谱法。

为达到上述目的，改进的苦参药材中苦参碱和氧化苦参碱的薄层色谱鉴别法主要包括以下步骤：

(1)取苦参碱对照品和氧化苦参碱对照品，分别加入乙醇，制成每1mL乙醇含0.2～0.3mg苦参碱对照品或氧化苦参碱对照品的溶液，分别作为苦参碱对照品溶液和氧化苦参碱对照品溶液；

(2)取苦参药材超微粉粉末0.3～0.5g，加0.25～0.3mL浓氨水和20～25mL三氯甲烷的混合溶液，250W超声15～25min，过滤，滤液水浴上蒸干，残渣加乙醇0.4～0.5mL使溶解，作为供试品溶液；

(3)吸取苦参碱对照品溶液和供试品溶液各3～4uL，依次点样于同一硅胶H薄层板同一水平线的不同位置，以氯仿-甲醇-浓氨-甲苯试液为展开剂，四者的质量比为5.5～6.5:0.6～0.7:0.5～0.6:0.5～0.8，展距为10～15cm，取出，晾干；所述H薄层色谱板在制备时掺有质量百分比为3～8％的十八烷基硅烷键合剂作为固色剂；

(4)分别吸取氧化苦参碱对照品溶液和供试品溶液各3～4uL，依次点样于同一硅胶G薄层板同一水平线的不同位置，以氯仿-乙醇-浓氨-乙酸乙酯试液为展开剂，四者的质量比为5.0～5.5:0.2～0.4:0.5～0.6:1.0～1.5，展距为10～15cm，取出，晾干；所述G薄层色谱板在制备时掺有质量百分比为2～6％的十八烷基硅烷键合剂作为固色剂；

(5)以碘化铋钾试液和质量浓度为0.5～0.6mol/L的盐酸按照体积比为1:3～5的混合试液作显色剂显色；白光下，在与对照品色谱相应的位置上，当显相同颜色的斑点则为合格苦参药材超微粉。

进一步地，步骤(1)中制成每1mL乙醇含0.25～0.28mg苦参碱对照品或氧化苦参碱对照品的溶液。

进一步地，步骤(2)中供试品溶液的制备方法为取苦参药材超微粉粉末0.4～0.5g，加0.3mL浓氨和25mL三氯甲烷的混合溶液，250W超声20～25min，过滤，滤液水浴上蒸干，残渣加乙醇0.5mL使溶解，作为供试品溶液。

进一步地，步骤(3)中以氯仿-甲醇-浓氨-甲苯试液为展开剂，四者的质量比为6.0～6.5:0.6～0.7:0.55:0.7～0.8。

进一步地，步骤(4)中以氯仿-乙醇-浓氨-乙酸乙酯试液为展开剂，四者的质量比为5.5:0.3～0.4:0.5～0.6:1.2～1.5。

进一步地，步骤(5)中以碘化铋钾试液和质量浓度为0.6mol/L的盐酸按照体积比为1:3的混合试液作显色剂显色。