[发明专利]具有抗氧化活性的小肽、制备方法及其应用

权利要求书

1.一种具有抗氧化活性的小肽，氨基酸序列为AREGETVVPG。

2.权利要求1所述小肽的制备方法，其特征在于包括如下步骤：

（1）将麦胚清蛋白采用胰蛋白酶酶解，得到清蛋白水解产物Ⅰ；

（2）取所述清蛋白水解产物Ⅰ中分子量小于10KDa的组分，采用凝胶过滤色谱分离，取具有抗氧化活性的组分作为清蛋白提取物Ⅱ；

（3）将所述清蛋白提取物Ⅱ采用碱性蛋白酶酶解，得到清蛋白水解产物Ⅲ；

（4）将所述清蛋白水解产物Ⅲ依次采用凝胶过滤色谱和反相高效液相色谱分离，得到所述小肽；

步骤（2）中所述凝胶过滤色谱中的凝胶填料为Sephadex G-75，流动相为水；

步骤（4）中所述凝胶过滤色谱中的凝胶填料Sephadex G-15，流动相为水，取具有抗氧化活性的洗脱液；

步骤（4）中所述反相高效液相色谱中使用Waters XBridgeTM prep C18色谱柱，洗脱程序为：0～10 min，流动相A 100～85%线性降低，流动相B 0～15%线性升高；10～15 min，流动相A 85～80%线性降低，流动相B 15～20%线性升高；收集对应于流动相B体积浓度为15.8～16%时的洗脱液，即得所述小肽；所述流动相A是浓度为0.05-0.15%三氟乙酸的水溶液，流动相B是浓度为0.05-0.15%三氟乙酸的乙腈溶液。

3.根据权利要求2所述制备方法，其特征在于步骤（1）中所述麦胚清蛋白采用如下方法获得：采用水提取脱脂麦胚粉中的清蛋白，加入硫酸铵至饱和度为70%-80%，搅拌，离心取沉淀。

4.根据权利要求3所述制备方法，其特征在于所述胰蛋白酶酶解过程中，每克清蛋白中加入6000-8000U胰蛋白酶，酶解温度为36.5-37.5℃，酶解pH7.0-8.0，酶解时间5-7h。

5.根据权利要求4所述制备方法，其特征在于步骤（3）中碱性蛋白酶酶解过程中，每克蛋白中加入碱性蛋白酶0.1-0.2AU，酶解温度45-55℃，酶解pH7.5-8.5，酶解时间1.0-2.0h。

6.权利要求1所述小肽在提高食品的稳定性、延长食品储藏期或者制备具有抗氧化活性的保健食品方面的应用。