[发明专利]一种人体血清中线粒体天冬氨酸氨基转移酶活性的定量测定方法、试剂及试剂盒在审
申请号: | 201510230706.1 | 申请日: | 2015-05-08 |
公开(公告)号: | CN104865214A | 公开(公告)日: | 2015-08-26 |
发明(设计)人: | 张益军 | 申请(专利权)人: | 浙江蓝森生物科技有限公司 |
主分类号: | G01N21/33 | 分类号: | G01N21/33 |
代理公司: | 暂无信息 | 代理人: | 暂无信息 |
地址: | 312000 浙江省*** | 国省代码: | 浙江;33 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 人体 血清 线粒体 天冬氨酸 氨基转移酶 活性 定量 测定 方法 试剂 试剂盒 | ||
1.一种定量测定人体血清中线粒体天冬氨酸氨基转移酶活性的试剂,该试剂由分别放置的试剂I和试剂II组成,其中,所述试剂I含有Tris缓冲液、L-天门冬氨酸、苹果酸脱氢酶、乳酸脱氢酶、c-AST羊抗人抗体、酶稳定剂;所述试剂II含有α-酮戊二酸、还原性辅酶。
2.根据权利要求1所述的试剂,其特征在于,所述试剂I中Tris缓冲液含量为50-150mmol/L,L-天门冬氨酸含量为100-500mmol/L,苹果酸脱氢酶含量为0.5-2KU/L,乳酸脱氢酶含量为0.2-1.5KU/L,c-AST羊抗人抗体含量为0.5-1.5ml/L,酶稳定剂含量为0.5-5g/L。
3.根据权利要求2所述的试剂,其特征在于,所述试剂I中Tris缓冲液含量为100mmol/L,L-天门冬氨酸含量为240mmol/L,苹果酸脱氢酶含量为1KU/L,乳酸脱氢酶含量为0.8KU/L,c-AST羊抗人抗体含量为0.8ml/L,酶稳定剂含量为1g/L。
4.根据权利要求1所述的试剂,其特征在于,所述试剂II中α-酮戊二酸含量为1-50mmol/L,还原性辅酶含量为0.05-1mmol/L。
5.根据权利要求4所述的试剂,其特征在于,所述试剂II中α-酮戊二酸含量为10mmol/L,还原性辅酶含量为0.2mmol/L。
6.一种定量测定人体血清中线粒体天冬氨酸氨基转移酶活性的试剂盒,其特征在于,其中装有权利要求1至5中任一所述的定量测定人体血清中线粒体天冬氨酸氨基转移酶活性的试剂,该试剂由分别放置的试剂I及试剂II组成。
7.一种定量测定人体血清中线粒体天冬氨酸氨基转移酶活性的方法,该方法包括向血清样品中加入所述试剂I,37℃孵育5分钟,然后向样品中加入试剂II,继续孵育1-2分钟后,在340nm波长下连续监测1-2分钟样本吸光度变化,计算样本每分钟平均吸光度变化值△A样本/min;用同样的方法测定空白管每分钟平均吸光度变化值△A空白/min;再通过下式(1)计算得到血清样品的线粒体天冬氨酸氨基转移酶活性:
m-AST活性(U/L)=(△A样本/min-△A空白/min)×K (1)
K=2090。
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