[发明专利]一种虫草素发酵固体培养基及其制备方法与应用有效
申请号: | 201510233106.0 | 申请日: | 2015-05-08 |
公开(公告)号: | CN104774888B | 公开(公告)日: | 2017-09-05 |
发明(设计)人: | 汤佳鹏 | 申请(专利权)人: | 南通大学 |
主分类号: | C12P19/40 | 分类号: | C12P19/40;C12R1/645 |
代理公司: | 江苏圣典律师事务所32237 | 代理人: | 胡建华 |
地址: | 226019*** | 国省代码: | 江苏;32 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 虫草 发酵 固体 培养基 及其 制备 方法 应用 | ||
1.一种虫草素发酵固体培养基在发酵生产虫草素中的应用,其特征在于,将在PDA斜面培养基上长好的蛹虫草菌种用5ml无菌生理盐水洗下,制成菌悬液,接种至灭菌好的装有50ml的发酵培养液摇瓶中,于27℃,180rpm恒温摇床培养4天,加入无菌水450ml,混合均匀后,再以1wt%接种至灭菌好的虫草素发酵固体培养基中,充分搅拌使菌种均匀分布于虫草素发酵固体培养基中,每24h时以1wt%比例补水维持相对湿度,并搅拌翻料,同时从发酵罐底部通入相对湿度为80%的无菌空气,通气比为0.5min-1,27℃培养4天后,通气比降为0.5h-1,每5天以5wt%喷淋加入含有0.5g/L腺嘌呤和2~6g/L三油酸甘油酯的培养液使其产生大量的子实体,其余条件不变,再培养21天后发酵结束;加入1.5倍固料体积的水,80℃搅拌翻料2h,过滤收集滤液;水煮过程进行三次,合并滤液,浓缩至固料体积,得到虫草素提取液;
其中,所述的虫草素发酵固体培养基的制备方法,包括如下步骤:
1)将葡萄糖40~50g/L,酵母膏3~10g/L,蛋白胨5~15g/L,磷酸二氢钾0.2~1.0g/L,磷酸氢二钾0.2~1.0g/L,硫酸镁0.2~1.0g/L,吐温80 0.5~5.0g/L,溶剂为水,充分搅拌溶解后调节溶液pH值5.5~6.0,制得发酵培养液;
2)将步骤1)中的发酵培养液与膨胀珍珠岩混合均匀,经喷雾干燥后装入发酵罐,121℃蒸汽灭菌20min,获得虫草素发酵固体培养基。
2.根据权利要求1所述的应用,其特征在于,步骤1)中,将葡萄糖42g/L,酵母膏6g/L,蛋白胨10g/L,磷酸二氢钾0.5g/L,磷酸氢二钾0.5g/L,硫酸镁0.5g/L,吐温80 2g/L,溶剂为水,充分搅拌溶解后调节溶液pH值5.8,制得发酵培养液。
3.根据权利要求1所述的应用,其特征在于,步骤2)中,所述的膨胀珍珠岩粒径为4~8mm。
4.根据权利要求1所述的应用,其特征在于,步骤2)中,发酵培养液与膨胀珍珠岩的体积质量比为30~50ml/g。
5.根据权利要求1所述的应用,其特征在于,步骤2)中,喷雾干燥后的物料含水量控制在2.5~5ml/g。
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