[发明专利]一种附甘药物质量检测方法

说明书

技术领域

本发明涉及一种附甘药物质量检测方法，属药品技术领域。

技术背景

中国发明专利（ZL201210536161.3）一种治疗过敏性鼻炎和支气管哮喘的药物,由附子6－18份，甘草9－1份为原料制成（命名为“附甘药物”），对于过敏性鼻炎和支气管哮喘有很好的疗效。

过敏性鼻炎及支气管哮喘均为Ⅰ型变态反应密切相关的呼吸系统疾病。属多发病、疑难病，且患病率有逐年增高的趋势。现有治疗过敏性鼻炎的药物主要有抗组胺类、糖皮质激素类、抗白三烯药、抗胆碱能药及拟肾上腺素药等，主要是鼻腔给药，长期使用易产生副作用和耐药性，愈后复发率高，长期疗效差。此外脱敏免疫治疗由于疗程长等原因受到限制而不能大面积临床推广。目前国内外此类药物的研究主要是现有药的剂型改造，重点是喷雾剂、吸入剂的长效剂型，以减少用药次数，降低副作用，提高患者的依从性。上述化药的特点是起效快，作用明显，但长期效果差，不能根治，易产生耐药性和副作用。

本发明已有的临床应用结果表明，本品对过敏性鼻炎及支气管哮喘的疗效确切、长期效果好、未见不良反应，在一定程度上弥补了化药只控制症状、长期效果差等的缺陷。

附甘药物的处方含有附子，附子所含生物碱主要有双酯类生物碱，单酯类生物碱和胺基醇类生物碱。其中双酯类生物碱毒性最大，属于难溶于水的脂溶性成分；单酯类生物碱属亲水性成分，毒性小，仅为双酯类生物碱的1/200；胺基醇类生物碱属强亲水性成分，毒性甚微，仅是双酯类生物碱的1/2000~1/4000。附子中剧毒成分为双酯型生物碱主要为乌头碱、新乌头碱与次乌头碱。口服双酯类生物碱3~4mg可致人死亡(急性毒性研究的LD₅₀为11.8mg/Kg)，说明双酯类生物碱毒性极强，其是临床应用受限的主要原因。

本发明所述附甘药物，现有技术没有制剂的质量检测方法，无法在生产和使用中有效保证产品质量，因此，为了保证附甘药物质量和临床用药效果及安全，提供一套简便、可靠的质量检测方法非常重要。

发明内容

本发明的目的是提供一种附甘药物的质量检测方法，确定有效成分含量及毒性成分（双酯生物碱）的限度，以保证药物的安全性、有效性和质量可控性。

本发明的目的通过以下技术方案实现：

本发明所述的一种附甘药物的质量检测方法，其特征在于：

【性状】  本品内容物为棕黄色至棕褐色，味微甜、微苦；

【鉴别】  (1)附子鉴别：照附子含量测定项下的方法试验，供试品色谱中应呈现与苯甲酰新乌头原碱、苯甲酰乌头原碱和苯甲酰次乌头原碱对照品色谱峰保留时间相对应的色谱峰；

(2) 甘草鉴别：取本品内容物0.5~2.5g，加乙醚40ml，加热回流1小时，滤过，弃去醚液，药渣加甲醇30ml，加热回流1小时，滤过，滤液蒸干，残渣加水40ml使溶解，用正丁醇提取3次，每次20ml，合并正丁醇液，用水洗涤3次，弃去水液，正丁醇液蒸干，残渣加甲醇1ml使溶解，作为供试品溶液；另取甘草对照药材1g，同法制成对照药材溶液；再取甘草苷对照品，加甲醇制成每1ml含2mg的溶液，作为对照品溶液；照薄层色谱法(《中国药典》2010年版一部附录Ⅵ B)试验，吸取上述三种溶液各5μl，分别点于同一用1％氢氧化钠溶液制备的硅胶G薄层板上，以正丁醇-浓氨试液-乙醇(5﹕2﹕1)为展开剂，展开，取出，晾干，喷以10％硫酸乙醇溶液，在105℃加热至斑点显色清晰，置紫外光灯(365nm)下检视；供试品色谱中，在与对照药材和对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的荧光斑点；

【检查】双酯型生物碱：照高效液相色谱法(《中国药典》2010年版一部附录Ⅵ D)测定；

色谱条件与系统适用性试验：以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以乙腈-四氢呋喃(25﹕15)为流动相A，以含0.03mol/L磷酸二氢钾的0.1%磷酸溶液为流动相B，按下表中的规定进行梯度洗脱，检测波长为232nm；理论板数按乌头碱峰计算应不低于30000；

表1  梯度洗脱程序