[发明专利]用于检测甜菜霜霉病菌的引物探针序列及检测试剂盒有效
| 申请号： | 201510246484.2 | 申请日： | 2015-05-13 |
| 公开（公告）号： | CN104830854B | 公开（公告）日： | 2018-06-19 |
| 发明（设计）人： | 张娜;乾义柯;魏霜;尚爽;欧阳艳;赛铁尔汗;刘中勇 | 申请（专利权）人： | 中华人民共和国伊犁出入境检验检疫局;伊犁师范学院 |
| 主分类号： | C12N15/11 | 分类号： | C12N15/11;C12Q1/6895;C12Q1/04 |
| 代理公司： | 深圳国新南方知识产权代理有限公司 44374 | 代理人： | 黄建才 |
| 地址： | 835000 新疆维吾尔自治*** | 国省代码： | 新疆;65 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 甜菜霜霉病 检测 检测试剂 引物探针 荧光定量PCR 进出口货物 病害防治 差异设计 产品检验 辅助检测 技术应用 特异引物 试剂盒 引物 近似 灵敏 检疫 预测 | ||
1.用于检测或辅助检测甜菜霜霉病菌的试剂盒，包括由序列表中序列1所示的DNA分子和序列表中序列2所示的DNA分子组成的引物对，还包括探针，所述探针的核苷酸序列为序列表中序列3。
2.根据权利要求1所述的试剂盒，其特征在于：所述探针的5′末端标记荧光基团，且3′末端标记淬灭基团。
3.根据权利要求1或2所述的试剂盒，其特征在于：所述序列表中序列1所示的DNA分子、所述序列表中序列2所示的DNA分子和所述探针的摩尔比为2-6: 2-6:1。
4.根据权利要求1或2所述的试剂盒，其特征在于：所述序列表中序列1所示的DNA分子、所述序列表中序列2所示的DNA分子和所述探针的摩尔比为4:4:1。
5.用于检测或辅助检测甜菜霜霉病菌的PCR试剂，包括权利要求1-4中任一项中的所述引物对和所述探针；所述引物对中各引物在所述PCR试剂中的终浓度为0.2-0.6 μmol/L，所述探针在所述PCR试剂中的终浓度为0.05-0.3 μmol/L。
6.根据权利要求5所述的PCR试剂，其特征在于：所述引物对中各引物在所述PCR试剂中的终浓度为0.4μmol/L，所述探针在所述PCR试剂中的终浓度为0.1μmol/L。
7.权利要求1-4中任一所述的试剂盒或权利要求5或6所述的PCR试剂在检测或辅助检测甜菜霜霉病菌中的应用。
8.权利要求1-4中任一所述的试剂盒或权利要求5或6所述的PCR试剂在制备检测或辅助检测甜菜霜霉病菌产品中的应用。
9.权利要求1-4中任一所述的试剂盒或权利要求5或6所述的PCR试剂在检测或辅助检测待测样本是否感染甜菜霜霉病菌中的应用；
或权利要求1-4中任一所述的试剂盒或权利要求5或6所述的PCR试剂在制备检测或辅助检测待测样本是否感染甜菜霜霉病菌产品中的应用。
10.一种检测或辅助检测待测样本是否感染甜菜霜霉病菌的方法，包括如下步骤：用权利要求1-4中任一所述的试剂盒中的所述引物对和所述探针对待测样本进行荧光定量PCR扩增，检测扩增产物；
若扩增产物有荧光信号且Ct值小于等于35且大于0，则待测样本感染或候选感染甜菜霜霉病菌；若扩增产物无荧光信号或有荧光型号且Ct值大于35，则待测样本未感染或候选未感染甜菜霜霉病菌。
11.根据权利要求10所述的方法，其特征在于：所述荧光定量PCR扩增的模板为待测样本的DNA。
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