[发明专利]一种黄酮醇3-O-葡萄糖基转移酶CsUGT78A14基因及其编码蛋白和应用有效
申请号: | 201510253488.3 | 申请日: | 2015-05-18 |
公开(公告)号: | CN105002193B | 公开(公告)日: | 2018-10-12 |
发明(设计)人: | 夏涛;崔利兰;赵贤倩;蒋晓岚;高丽萍;刘亚军 | 申请(专利权)人: | 安徽农业大学 |
主分类号: | C12N15/54 | 分类号: | C12N15/54;C12N9/10;A23L33/17;C12N15/70;C12N1/21;C12R1/19 |
代理公司: | 合肥中谷知识产权代理事务所(普通合伙) 34146 | 代理人: | 洪玲 |
地址: | 230000 *** | 国省代码: | 安徽;34 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 黄酮 葡萄 糖基转移酶 csugt78a14 基因 及其 编码 蛋白 应用 | ||
1.一种黄酮醇3-O-葡萄糖基转移酶CsUGT78A14基因,其特征在于,该基因的获得方法,包括以下步骤:
(1)设计带有表达载体pMal-c2X载体的多克隆酶切位点的特异引物,其引物序列如SEQID NO:3和SEQ ID NO:4所示:
SEQ ID NO:3:正向引物:5’-
SEQ ID NO:4:反向引物:5’-
(2)按照TaKaRa RNAiso试剂盒和RNAiso Plus试剂盒说明书,提取茶树品种农抗早鲜叶RNA,并反转录为cDNA;
(3)以反转录产物cDNA为模板,用SEQ ID NO:3和SEQ ID NO:4引物进行扩增,扩增程序为94℃预变性30s,94℃变性10s,62℃退火20s,72℃延伸50s,30个循环,72℃继续延伸10min,获得的PCR产物,即为所述CsUGT78A14基因。
2.一种如权利要求1所述的黄酮醇3-O-葡萄糖基转移酶CsUGT78A14基因在改善茶饮料滋味中的应用。
3.一种重组质粒,其特征在于,所述重组质粒含有如权利要求1所述黄酮醇3-O-葡萄糖基转移酶CsUGT78A14基因。
4.根据权利要求3所述的一种重组质粒,其特征在于,所述重组质粒为将黄酮醇3-O-葡萄糖基转移酶CsUGT78A14基因连接到pMal-c2X载体的多克隆位点中构建获得,命名为pMal-c2X-CsUGT78A14。
5.一种转基因工程菌,其特征在于,所述转基因工程菌含有如权利要求3所述的重组质粒,或其基因组中整合有如权利要求1所述的黄酮醇3-O-葡萄糖基转移酶CsUGT78A14基因序列。
6.根据权利要求5所述的转基因工程菌,其特征在于,所述转基因工程菌为含有如权利要求3所述的重组质粒,或其基因组中整合有如权利要求1所述的黄酮醇3-O-葡萄糖基转移酶CsUGT78A14基因序列的大肠杆菌Novablue(DE3)菌株。
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