[发明专利]一种黄酮醇3-O-葡萄糖基转移酶CsUGT78A14基因及其编码蛋白和应用有效

专利信息
申请号: 201510253488.3 申请日: 2015-05-18
公开(公告)号: CN105002193B 公开(公告)日: 2018-10-12
发明(设计)人: 夏涛;崔利兰;赵贤倩;蒋晓岚;高丽萍;刘亚军 申请(专利权)人: 安徽农业大学
主分类号: C12N15/54 分类号: C12N15/54;C12N9/10;A23L33/17;C12N15/70;C12N1/21;C12R1/19
代理公司: 合肥中谷知识产权代理事务所(普通合伙) 34146 代理人: 洪玲
地址: 230000 *** 国省代码: 安徽;34
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摘要:
搜索关键词: 一种 黄酮 葡萄 糖基转移酶 csugt78a14 基因 及其 编码 蛋白 应用
【权利要求书】:

1.一种黄酮醇3-O-葡萄糖基转移酶CsUGT78A14基因,其特征在于,该基因的获得方法,包括以下步骤:

(1)设计带有表达载体pMal-c2X载体的多克隆酶切位点的特异引物,其引物序列如SEQID NO:3和SEQ ID NO:4所示:

SEQ ID NO:3:正向引物:5’-TCTAGAATGAACGGTGACTCCCAACAACACC-3’

SEQ ID NO:4:反向引物:5’-GTCGACTTAAGGGTGCTTACAAGCTTTGATTACC-3’;

(2)按照TaKaRa RNAiso试剂盒和RNAiso Plus试剂盒说明书,提取茶树品种农抗早鲜叶RNA,并反转录为cDNA;

(3)以反转录产物cDNA为模板,用SEQ ID NO:3和SEQ ID NO:4引物进行扩增,扩增程序为94℃预变性30s,94℃变性10s,62℃退火20s,72℃延伸50s,30个循环,72℃继续延伸10min,获得的PCR产物,即为所述CsUGT78A14基因。

2.一种如权利要求1所述的黄酮醇3-O-葡萄糖基转移酶CsUGT78A14基因在改善茶饮料滋味中的应用。

3.一种重组质粒,其特征在于,所述重组质粒含有如权利要求1所述黄酮醇3-O-葡萄糖基转移酶CsUGT78A14基因。

4.根据权利要求3所述的一种重组质粒,其特征在于,所述重组质粒为将黄酮醇3-O-葡萄糖基转移酶CsUGT78A14基因连接到pMal-c2X载体的多克隆位点中构建获得,命名为pMal-c2X-CsUGT78A14。

5.一种转基因工程菌,其特征在于,所述转基因工程菌含有如权利要求3所述的重组质粒,或其基因组中整合有如权利要求1所述的黄酮醇3-O-葡萄糖基转移酶CsUGT78A14基因序列。

6.根据权利要求5所述的转基因工程菌,其特征在于,所述转基因工程菌为含有如权利要求3所述的重组质粒,或其基因组中整合有如权利要求1所述的黄酮醇3-O-葡萄糖基转移酶CsUGT78A14基因序列的大肠杆菌Novablue(DE3)菌株。

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