[发明专利]一种需氧菌性及细菌性阴道病联合测定试剂盒

权利要求书

1.一种需氧菌性及细菌性阴道病联合测定试剂盒，其特征在于：包括显色剂和反应装置，所述反应装置包括氧化氢反应垫、唾液酸苷酶反应垫、白细胞酯酶反应垫、β-葡萄糖醛酸苷酶反应垫和凝固酶反应垫。

2.根据权利要求1所述一种需氧菌性及细菌性阴道病联合测定试剂盒，其特征在于：所述过氧化氢反应垫上包被有4-氨基安替吡啉、磷酸盐、3,5二氯二羟基苯磺酸和过氧化物酶。

3.根据权利要求1所述一种需氧菌性及细菌性阴道病联合测定试剂盒，其特征在于：所述唾液酸苷酶反应垫上包被有甲酚酯、乙酸盐和冰乙酸。

4.根据权利要求1所述一种需氧菌性及细菌性阴道病联合测定试剂盒，其特征在于：所述白细胞酯酶反应垫上包被有5溴-4氯-3吲哚乙酸盐、磷酸盐。

5.根据权利要求1所述一种需氧菌性及细菌性阴道病联合测定试剂盒，其特征在于：所述β-葡萄糖醛酸苷酶反应垫上包被有5溴-4氯-3吲哚基β-D-葡萄糖醛酸钠、磷酸盐和氯化钙。

6.根据权利要求1所述一种需氧菌性及细菌性阴道病联合测定试剂盒，其特征在于：所述凝固酶反应垫包被有甘氨酰-精氨酰4-甲基-β-萘胺盐酸盐和三羟甲基氨基甲烷（tris-hcl）。

7.根据权利要求1所述一种需氧菌性及细菌性阴道病联合测定试剂盒，其特征在于：所述显色剂包括显色剂A和显色剂B，所述显色剂A为0.2%氢氧化钠溶液，所述显色剂B为25g/L固蓝Ｂ溶液；稀释液为0.9%的氯化钠溶液。

8.一种需氧菌性及细菌性阴道病联合测定试剂盒的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：

1）过氧化氢反应垫的制备

分别称取浓度为3.2×105U/L的过氧化物酶20mg、3,5二氯二羟基苯磺0.25g、4-氨基安替吡啉0.3g加入100ml浓度为200mmol/L的磷酸盐缓冲液中，充分搅拌溶解，再调节PH至5.0±0.2，然后用移液枪吸取2ul药液注入空白膜上，最后将滴有溶液的药膜置于烘箱中35℃干燥4小时制得过氧化氢反应垫；

2）唾液酸苷酶反应垫的制备

称取甲酚酯0.35g、加入99ml浓度为260mmol/L的乙酸盐缓冲液中充分搅拌溶解，再加入1ml浓度为4mol/L的冰乙酸将PH降至6.5±0.2，然后用移液枪吸取2ul药液注入空白膜上，最后将滴有溶液的药膜置于温度20℃，湿度在50%下干燥8小时制得唾液酸苷酶反应垫；

3）白细胞酯酶反应垫的制备

称取5溴-4氯-3吲哚乙酸盐0.2g，加入100ml浓度为180mmol/L的磷酸盐缓冲液中，搅拌溶解，再调节PH至5.8±0.2，然后用移液枪吸取2ul药液注入空白膜上，最后将滴有溶液的药膜置于温度20℃，湿度在50%下干燥8小时制得白细胞酯酶反应垫；

4）β-葡萄糖醛酸苷酶反应垫的制备

分称取5溴-4氯-3吲哚基β-D-葡萄糖醛酸钠0.25g、氯化钠90mg 加入磷酸盐缓冲液中，搅拌溶解，再调节PH至6.3±0.2，然后用移液枪吸取2ul药液注入空白膜上，最后将滴有溶液的药膜置于温度20℃，湿度在50%下干燥8小时制得β-葡萄糖醛酸苷酶反应垫；

5）凝固酶反应垫的制备

称取甘氨酰-精氨酰4-甲基-β-萘胺盐酸盐0.25g，加入100ml浓度为185mmol/L三羟甲基氨基甲烷(tris-hcl)缓冲液中，搅拌溶解，再调节PH至7.5±0.2，然后用移液枪吸取2ul药液注入空白膜上，最后将滴有溶液的药膜置于温度20℃，湿度在50%下干燥8小时制得凝固酶反应垫；

6）显色剂的制备

显色剂A，称取2g氢氧化钠加入1000ml纯化水中，搅拌溶解制得0.2%氢氧化钠溶液，取1ml装瓶得显色剂A；

显色剂B，称取1g固蓝B加入99ml纯化水中，搅拌溶解，再滴加1ml聚氧乙烯月桂醚搅拌均匀制得显色剂B；

稀释液，称取0.9g氯化钠加入100ml纯化水中，搅拌溶解制得稀释液。

9.一种需氧菌性及细菌性阴道病联合测定试剂盒的使用方法，其特征在于，包括以下步骤：用吸管吸取样本液，分别在反应装置上的氧化氢反应垫、唾液酸苷酶反应垫、白细胞酯酶反应垫、β-葡萄糖醛酸苷酶反应垫和凝固酶反应垫上滴加1滴样本液，每滴约30μl，将反应装置置于37±1℃水浴箱或48℃干浴器中显色15分钟后，在唾液酸苷酶反应垫上加1滴显色液A，在凝固酶反应垫上加1滴显色剂B，30秒钟后判读结果。