[发明专利]一种日本乙型脑炎病毒实时荧光等温扩增检测试剂盒及其引物和探针

权利要求书

1.一种日本乙型脑炎病毒NS1基因实时荧光等温扩增检测试剂盒，其特征在于，该试剂盒含有用于实时荧光等温扩增法检测日本乙型脑炎病毒NS1基因的特异性引物对和分子信标探针，所述的特异性引物对包括正向引物Primer-1和反向引物Primer-2，Primer-1的碱基序列如SEQ ID NO：1所示，Primer-2的碱基序列如SEQ ID NO：2所示，所述的分子信标探针在其寡核苷酸DNA分子的5’端标记荧光报告基团FAM，3’端标记促灭基团DABCYL，探针的寡核苷酸DNA分子的碱基序列如SEQ ID NO：3所示。

2.根据权利要求1所述的日本乙型脑炎病毒NS1基因实时荧光等温扩增检测试剂盒，其特征在于，该试剂盒包括以下成分：

2×实时NASBA反应液：含有100mM Tris-HCl，100mM KCl，20mM MgCl₂，20mM DTT，20% DMSO，4mM NTP，1mM dNTP，各0.125μM 的Primer-1、Primer-2，以及0.25μM 分子信标探针；

4×酶混合液：含有1.6U/μL AMV反转录酶，8U/μL T7 RNA聚合酶，0.04U/μL Rnase H，2U/μL Ribonuclease Inhibitor，0.1%的BSA。

3.根据权利要求2所述的日本乙型脑炎病毒NS1基因实时荧光等温扩增检测试剂盒，其特征在于，该试剂盒含有以下成分：

阳性对照：为日本乙型脑炎病毒体外转录的NS1基因的RNA片段；

阴性对照：为无菌生理盐水，在核酸提取时与标本同时平行提取以作为阴性对照使用；

空白对照：为无核酸酶的超纯水。