[发明专利]一种嗜氯节杆菌海藻糖合成酶及其编码基因和应用在审
申请号: | 201510256646.0 | 申请日: | 2015-05-20 |
公开(公告)号: | CN104877984A | 公开(公告)日: | 2015-09-02 |
发明(设计)人: | 江波;沐万孟;蔡雪;张涛 | 申请(专利权)人: | 江南大学 |
主分类号: | C12N9/90 | 分类号: | C12N9/90;C12N15/61;C12N15/70;C12N1/21;C12P19/24;C12P19/12;C12R1/19 |
代理公司: | 无锡市大为专利商标事务所(普通合伙) 32104 | 代理人: | 时旭丹;刘品超 |
地址: | 214122 江苏省无锡市滨湖区蠡湖*** | 国省代码: | 江苏;32 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 嗜氯节 杆菌 海藻 合成 及其 编码 基因 应用 | ||
1.一种海藻糖合成酶,其氨基酸序列如 SEQ ID NO.2所示。
2.权利要求1所述的海藻糖合成酶的编码基因,其特征在于:所述的海藻糖合成酶的编码基因从嗜氯节杆菌(Arthrobacter Chlorophenolicus SK33.001)克隆得到,具有下述核苷酸序列之一:
(1)序列表中的SEQ ID NO.1的核苷酸序列;
(2)编码序列表中SEQ ID NO.2 氨基酸序列的多核苷酸。
3.含有权利要求2所述的海藻糖合成酶编码基因的重组表达载体、转基因细胞系或转基因重组菌。
4.根据权利要求3所述的重组表达载体,其特征在于所述的重组表达载体为将权利要求2所述的海藻糖合成酶编码基因插入到大肠杆菌表达载体中得到的表达海藻糖合成酶的重组表达载体;所述的大肠杆菌表达载体优选为pET-28a载体。
5.根据权利要求3所述的转基因重组菌,其特征在于所述的转基因重组菌是将权利要求4所述重组表达载体导入大肠杆菌中,筛选得到表达海藻糖合成酶的转基因重组菌;所述的大肠杆菌优选为大肠杆菌BL21(DE3)。
6.权利要求2说述的海藻糖合成酶编码基因的应用,其特征在于在表达海藻糖合成酶中的应用。
7.权利要求1所述的海藻糖合成酶的应用,其特征在于在制备海藻糖中的应用。
8.一种表达权利要求1所述的海藻糖合成酶的方法,其特征在于是培养权利要求3或5所述的转基因重组菌得到海藻糖合成酶。
9.一种制备海藻糖的方法,其特征在于是以麦芽糖为底物,用权利要求1所述的海藻糖合成酶进行催化反应,得到海藻糖;反应底物麦芽糖浓度为100mM,适合反应温度20~40℃,适合反应pH在6~7.5。
10.根据权利要求9所述的制备海藻糖的方法,其特征在于酶反应的最适反应温度为30℃;最适反应pH为7.5。
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