[发明专利]酒饼簕宁的制备方法及其在抗白血病药物中的应用

说明书

技术领域

本发明公开了一种植物提取物的制备方法及应用，特别涉及酒饼簕宁的制备方法及其在抗白血病药物中的应用。

背景技术

 单叶酒饼簕（Atalantia monophylla）以根入药，具有祛风解表，化痰止咳，理气止痛的功效，主治感冒，头痛，咳嗽，支气管炎等症，主要有效成分为生物碱、黄酮苷类。

酒饼簕宁，分子式：C₂₃H₂₃NO₄，分子量：377.44，为无色柱状结晶，熔点205～207℃。酒饼簕宁具有抗疟活性，体外10μg/ml时，对约尔疟原虫(Plasmodium yoelii)的抑制率为94±4%（同氯喹二磷酸盐）；小鼠腹腔注射50mg/kg时，对疟原虫(P.berghei和P.vinckei)有明显预防作用。酒饼簕宁还具有抗癌作用，能抑制白血病细胞L1210生长，ED50为1.0μg/ml。

白血病是一类造血干细胞恶性克隆性疾病。克隆性白血病细胞因为增殖失控、分化障碍、凋亡受阻等机制在骨髓和其他造血组织中大量增殖累积，并浸润其他组织和器官，同时正常造血受抑制。临床可见不同程度的贫血、出血、感染发热以及肝、脾、淋巴结肿大和骨骼疼痛。据报道，我国各地区白血病的发病率在各种肿瘤中占第六位。         

发明内容

为满足临床需要，扩大用药品种，更好地治疗癌症，提供一种酒饼簕宁的制备方法及其在抗白血病药物中的应用。

为了实现上述目的，本发明采用以下技术方案：

酒饼簕宁的制备方法，其特征在于包括以下步骤：

（1）提取：取干燥头花千金藤块根，经粉碎处理，加8-15倍90-99%乙醇水溶液在30-45℃的温度下进行连续逆流超声提取30-60min，过滤，得到提取液；

（2）色谱柱层析：以氧化铝或硅胶为填料，石油醚-乙酸乙酯梯度洗脱，收集目标洗脱液，浓缩干燥得粗提物；

（3）高速逆流色谱法分离：采用高速逆流色谱法分离纯化粗提物中的酒饼簕宁，其两相溶剂系统为石油醚-乙酸乙酯-甲醇-水，上相注满高速逆流色谱柱为固定相，转动主机，泵入下相做流动相，流动相溶解粗提物由进样阀进样，紫外检测器在线监测，收集酒饼簕宁组分；

（4）重结晶：将酒饼簕宁组分进行真空浓缩，放置析晶，滤出结晶，用石油醚-丙酮重结晶，过滤、洗涤干燥即得酒饼簕宁。

所述步骤（1）中超声频率为45-65KHz。

所述步骤（2）中石油醚-乙酸乙酯体积比为6:1-2:1。

所述步骤（3）中石油醚-乙酸乙酯-甲醇-水溶剂系统的体积比为5-7:5-7:4-7:4-6。

所述步骤（4）中石油醚-丙酮体积比为5:1。

所述制备的酒饼簕宁，在制备抗白血病药物中的应用，尤其在制备防治淋巴性白血病和髓细胞白血病的应用。

所述制备的酒饼簕宁，在其口服配方中添加肠吸收促进剂，包含中链脂肪酸盐、胆酸盐、鹅去氧胆酸盐、壳聚糖及其衍生物中的一种或几种。

采用本法制备酒饼簕宁，工艺简便易操作，制备量大，产品得率高，而且低污染；添加肠吸收促进剂，有利于提高生物利用度。

下面将结合具体实施方式进一步说明本发明，但本发明要求保护的范围并不局限于下列实施方式。

具体实施方式

实施例1：

酒饼簕宁的制备

取干燥头花千金藤块根，经粉碎处理，称取1kg，加8倍90%乙醇溶液在45℃的温度下进行连续逆流超声提取30min，超声频率为50KHz，过滤，得到提取液，浓缩得到浸膏（密度为1.18），用乙酸乙酯溶解干法拌样后进行常压色谱柱层析，层析柱以氧化铝为填料，粒度为100目，石油醚-乙酸乙酯6:1、4:1、2:1梯度洗脱，收集目标洗脱液，浓缩干燥得粗提物；采用高速逆流色谱法分离纯化粗提物中的酒饼簕宁，以体积比7:7:6:4石油醚-乙酸乙酯-甲醇-水为两相溶剂系统，上相注满高速逆流色谱柱为固定相，转动主机，泵入下相做流动相，流动相溶解粗提物由进样阀进样，紫外检测器在线监测，检测波长为217nm，收集酒饼簕宁组分，进行真空浓缩，放置析晶，滤出结晶，用体积比为5:1石油醚-丙酮重结晶，过滤、洗涤干燥即得酒饼簕宁，含量98.7%。

实施例2：

酒饼簕宁的制备