[发明专利]基于长链非编码RNA AFAP1-AS1的干扰制剂及其应用方法

权利要求书

1.长链非编码RNA AFAP1-AS1基因在制备干扰和抑制剂上的应用方法，其特征在于，根据该长链非编码RNA基因制备了用于干扰其表达，并抑制肺癌细胞侵袭转移的制剂；该长链非编码RNA AFAP1-AS1的序列如SEQ NO:1所示。

2.根据权利要求1所述的应用方法，其特征在于，所述的制剂是针对该长链非编码RNA基因设计的用于RNA干扰的短发夹RNA表达载体。

3.根据权利要求2所述的应用方法，其特征在于，将所述的表达载体负载到多聚赖氨酸修饰的硅纳米颗粒上制成纳米球。

4.根据权利要求3所述的应用方法，其特征在于，所述的用于制备用于RNA干扰的短发夹RNA表达载体所需的3条干扰靶点序列如下：

shRNA-1：GCAATTCACTGAGTGGTTACG

shRNA-2：GCTTACTCTCTTGGTGATTCT

shRNA-3：GCAAGACATCCGATGGTATAC。

5.根据权利要求4所述的应用方法，其特征在于，

针对3条干扰靶点序列，以及载体，设计可形成发夹结构的寡核苷酸单链及其反向互补序列，它们退火后即可形成两端分别带限制性酶切位点粘性末端的DNA双链；具体序列如下：

shRNA-1：

5’-GATCCCC GCAATTCACTGAGTGGTTACG TTCAAGAGA CGTAACCACTCAGTGAATTGC TTTTTA-3’

3’-GGG CGTTAAGTGACTCACCAATGC AAGTTCTCT GCATTGGTGAGTCACTTAACG AAAAATTCGA-5’

shRNA-2：

5’-GATCCCC GCTTACTCTCTTGGTGATTCT TTCAAGAGA AGAATCACCAAGAGAGTAAGC TTTTTA-3’

3’-GGG CGAATGAGAGAACCACTAAGA AAGTTCTCT TCTTAGTGGTTCTCTCATTCG AAAAATTCGA-5’

shRNA-3：

5’-GATCCCC GCAAGACATCCGATGGTATAC TTCAAGAGA GTATACCATCGGATGTCTTGC TTTTTA-3’

3’-GGG CGTTCTGTAGGCTACCATATG AAGTTCTCT CATATGGTAGCCTACAGAACG AAAAATTCGA-5’。