[发明专利]玉米转化事件“双抗12-5”及其特异性鉴定方法无效
| 申请号： | 201510267044.5 | 申请日： | 2015-05-22 |
| 公开（公告）号： | CN104946631A | 公开（公告）日： | 2015-09-30 |
| 发明（设计）人： | 沈志成;林朝阳;张先文;徐晓丽 | 申请（专利权）人： | 杭州瑞丰生物科技有限公司 |
| 主分类号： | C12N15/11 | 分类号： | C12N15/11;C12N5/10;C12Q1/68;C12R1/91 |
| 代理公司： | 杭州天正专利事务所有限公司 33201 | 代理人： | 黄美娟;李世玉 |
| 地址： | 311121 浙江省*** | 国省代码： | 浙江;33 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 玉米 转化 事件 双抗 12 及其 特异性 鉴定 方法 | ||
1.一种玉米转化事件“双抗12-5”，其特征在于所述转化事件以SEQ ID NO.1所示的核苷酸序列为外源基因的左侧翼区，以SEQ ID NO.3所示的核苷酸序列为外源基因的右侧翼区。
2.如权利要求1所述的玉米转化事件“双抗12-5”，其特征在于所述外源基因包括抗虫基因和抗草甘膦基因。
3.如权利要求2所述的玉米转化事件“双抗12-5”，其特征在于所述抗虫基因由二个Bt基因组成。
4.如权利要求3所述的玉米转化事件“双抗12-5”，其特征在于抗虫基因的核苷酸序列为SEQ ID NO.4所示。
5.如权利要求2所述的玉米转化事件“双抗12-5”，其特征在于所述抗草甘膦基因的核苷酸序列为SEQ ID NO.5所示。
6.如权利要求1所述的玉米转化事件“双抗12-5”，其特征在于所述外源基因的核苷酸序列为SEQ ID NO.2所示。
7.一种玉米转化事件“双抗12-5”特异性的PCR鉴定方法，其特征在于所述用于玉米转化事件“双抗12-5”特异性PCR鉴定的引物为：
SP1：5’-TTTCTCCATAATAATGTGTGAGTAGTTCCC-3’；
RB-Test：5’-CTCGTCATCGACCAAGTCATGAAG-3’。
R1：5’-CGTCGTTTTACAACGTCGTGACTGG-3’；
LB-test：5’-AAGACGTCCGGGGGAACCGTTGTTC-3’。
8.如权利要求7所述的方法，其特征在于所述PCR反应体系为：
PCR反应条件为：32个循环，每个循环是95℃，45秒；65℃，50秒；72℃，30秒。
9.一种含“双抗12-5”转化事件的植物细胞，所述植物细胞来源于玉蜀黍属玉米(Zea mays L.)，所述玉蜀黍属玉米保藏于中国典型培养物保藏中心，保藏号CCTCC P201506，保藏日期：2015年4月27日，保藏地址：中国武汉武汉大学，邮编430072。
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