[发明专利]一种玛咖中苄基芥子油苷的含量测定方法

权利要求书

1.一种玛咖中苄基芥子油苷的含量测定方法，其特征在于，该方法是以苄基芥子油苷为指标成分，通过对其定量测定来进行的。

2.根据权利要求1所述的含量测定方法，其特征在于，所述定量是通过使用高效液相色谱法来进行的。

3.根据权利要求2所述的含量测定方法，其特征在于，

a.色谱条件的建立

色谱柱：C18柱(4.6×250mm,5μm)；

流动相：甲醇-水(梯度洗脱：0-5min，3％-8％甲醇；5-9min，8％-48％甲醇；9-23min，48％-62％；23-25min，62％-95％)；25-28min，95％甲醇；

进样量为10μL，检测波长302nm，流速为1.0mL/min，流速为1.0mL/min，柱温40℃；

b.葡糖硫苷酶溶液配制

精密称取1mg葡糖硫苷酶，置于10mL容量瓶内，加蒸馏水溶解，定容，配制成每毫升含0.33UN的酶活力溶液；

c.标准曲线的绘制

精确称取BITC标准品250mg，用甲醇定容至25mL容量瓶内，配制成10mg/mL的标准品溶液；分别移取20μL、50μL、100μL、150μL、200μL，分别用甲醇定容至10mL容量瓶内，制成浓度为0.02mg/mL、0.05mg/mL、0.10mg/mL、0.15mg/mL、0.20mg/mL的标准品溶液，用以制作标准曲线；在a项下色谱条件，分别进样10μL，以对照品质量浓度X(g/L)为横坐标，对照品峰面积Y为纵坐标进行线性回归，绘制标准曲线，所得回归方程Y＝4886.3X+6.4890(R2＝0.9994，n＝5)，表明BITC在0～0.20mg/mL范围内有较好的线性关系；

d.供试品溶液

精密称取100mg样品，置于10mL容量瓶内，加5mL 47.5％乙醇/水溶液(V/V)，50℃水浴超声1小时，样品放置室温后，用47.5％乙醇/水溶液(V/V)定容至10mL；精密量取上述溶液4mL，置于10mL的顶空瓶内，添加1mL的b项中的酶溶液，摇匀后，加盖密闭。置于45℃的恒温水浴锅内酶解30min，取出转移至10mL容量瓶内，用47.5％乙醇/水溶液(V/V)定容至10mL，经0.22μm微孔滤膜过滤后，用于HPLC检测；

e.加样回收率试验

精密称取9份已知含量的同一批次供试品溶液，分别加入高、中、低浓度的对照品溶液，按照d项方法，每个浓度配制三份，按照d项下方法配制供试品溶液，进样测定峰面积，BITC的平均回收率为99％，RSD为1.3％；

f.精密度试验

取BITC对照品溶液10μL，在a项色谱条件下连续进样五次，结果色谱峰面积的RSD为0.8％，表明仪器的精密度良好；

g.稳定性试验

取供试品溶液，在a项色谱条件下分别在0、2、4、6、8、10h进样，进样量为10μL，结果BITC的RSD为1.06％，表明供试品溶液在室温下10h内稳定；

h.重复性实验

按照a项方法平行制备6份供试品，各吸取10μL进样重复进样分析测定峰面积，BITC的RSD为0.7％，表明方法重复性良好。