[发明专利]抗原结合单元稳定的嵌合抗原受体及制备方法与应用

权利要求书

1.一种抗原结合单元稳定的嵌合型抗原受体，其包含胞外的抗原结合单元、跨膜结构域、以及细胞内共刺激信号域；

其中所述抗原结合单元相对于肿瘤特异性靶点表达稳定，所述抗原结合单元是scFv，其包含通过铰链相连接的重链以及轻链；

所述铰链由SEQ ID NO.2所示的氨基酸序列组成；

所述的重链由SEQ ID NO.1所示的氨基酸序列组成；

所述的轻链由SEQ ID NO.3所示的氨基酸序列组成；

其中，嵌合型抗原受体针对肿瘤特异靶点CD19的稳定抗原结合单元。

2.如权利要求1所述的嵌合型抗原受体，其中跨膜结构域由SEQ ID NO.10所示的氨基酸序列组成；其中所述细胞内共刺激信号域为融合CD3ζ信号域和CD28及CD137的细胞内结构域的混合型细胞内共刺激信号域；或者，所述的细胞内共刺激信号域选自CD27,CD28,4-1BB,OX40,CD30,CD40,PD-1,ICOS,淋巴细胞功能相关抗原-1,CD2,CD7,LIGHT,NKG2C,B7-H3，CD83的特异性配体以及它们的任意组合。

3.如权利要求2所述的嵌合型抗原受体，其中所述的细胞内共刺激信号域由SEQ IDNO.11所示的氨基酸序列组成。

4.制备表达如权利要求1-3所述嵌合型抗原受体的细胞的方法，其包括如下步骤，(a)获得外周血单核细胞；(b)转化或感染外周血单核细胞，将编码权利要求1-3所述的嵌合型抗原受体的表达框DNA整合到细胞染色体。

5.如权利要求4所述的方法，其中表达所述嵌合型抗原受体的细胞选自T细胞，NK细胞，其中T细胞是细胞毒性T淋巴细胞、调节性T细胞，是自体、同种异体或异种T细胞。

6.表达如权利要求1-3所述的嵌合型抗原受体的细胞在制备抗肿瘤相关药物中的用途；其中，所述肿瘤是CD19阳性。

7.根据权利要求6所述的用途，所述的肿瘤是白血病或淋巴瘤。

8.根据权利要求6所述的用途，所述的肿瘤是淋巴细胞白血病。

9.如权利要求6所述的用途，其中患者至少对一种化疗药物产生抵抗。