[发明专利]从三种高山鼠尾草植物中制备隐丹参酮化学对照品的方法

权利要求书

1.从三种高山鼠尾草植物中制备隐丹参酮化学对照品的方法，包括以下步骤：

⑴微孔树脂除杂：

按常规方法制得的棕红色浸膏状的粘毛鼠尾草、甘西鼠尾草或康定鼠尾草中的一种醇提物用其质量10~20倍的体积分数30~50%的乙醇溶液溶解，过滤得到滤液A，该滤液A上微孔树脂柱分离，先以2~5倍柱体积的水溶液洗脱除去杂质，然后用2~5倍柱体积、体积分数30~90%的甲醇溶液进行台阶梯度洗脱，收集70%~90%甲醇水洗脱物，该甲醇水洗脱物经减压干燥得丹参酮类组分粗品；所述粘毛鼠尾草、甘西鼠尾草或康定鼠尾草中的一种醇提物与所述微孔树脂比例为1 g：10 mL；

⑵硅胶柱富集：

将所述丹参酮类组分粗品经硅胶柱色谱分离后，用3~5倍柱体积的氯仿-甲醇-水混合溶剂洗脱，按每份500 mL收集馏分，并经薄层色谱检测，其中展开剂为氯仿-甲醇-水混合溶剂，显色剂为体积浓度10%的浓硫酸乙醇溶液，合并Rf值为0.75~0.85的馏分；所述Rf值为0.75~0.85的馏分经减压干燥即得红色粉末状的隐丹参酮粗品；

⑶反相液相制备色谱精制：

所述隐丹参酮粗品用其质量5~10倍的体积分数为80%~100%的甲醇溶液溶解，然后配制样品浓度为100.0~200.0 mg/mL，经0.45μm微孔滤膜过滤，得到滤液B，该滤液B经反相液相制备色谱分离，经检测波长为254 nm的紫外检测器检测，收集制备色谱图中主要的色谱峰馏分，该色谱峰馏分经减压干燥即得纯度大于98%的红色粉末状的对照品。

2.如权利要求1所述的从三种高山鼠尾草植物中制备隐丹参酮化学对照品的方法，其特征在于：所述步骤⑴和所述步骤⑵及所述步骤⑶中的减压干燥的条件均是指真空度为0.06~0.09 MPa，温度为50~70 ℃。

3.如权利要求1所述的从三种高山鼠尾草植物中制备隐丹参酮化学对照品的方法，其特征在于：所述步骤⑵中硅胶柱的尺寸为30 mm~60 mm×60 mm ~100 mm。

4.如权利要求1所述的从三种高山鼠尾草植物中制备隐丹参酮化学对照品的方法，其特征在于：所述步骤⑵中氯仿-甲醇-水混合溶剂是指将氯仿、甲醇、水按9：1：0.1~8：2：0.2体积比混合均匀而得。

5.如权利要求1所述的从三种高山鼠尾草植物中制备隐丹参酮化学对照品的方法，其特征在于：所述步骤⑶中反相液相制备色谱分离的工作参数是指色谱柱柱长250 mm、直径50 mm，反相液相制备柱固定相为10 μm Megress C18，流动相为体积分数65%~75%的甲醇-水溶液，进样体积为10~15mL，流速为80 mL/min。