[发明专利]特异性抗烟曲霉菌感染的鸡卵黄抗体的制备和应用在审
申请号: | 201510275294.3 | 申请日: | 2015-05-26 |
公开(公告)号: | CN104844709A | 公开(公告)日: | 2015-08-19 |
发明(设计)人: | 赵桂秋;林静;高昂;徐强;黄晓明;王谦;姜楠;胡丽婷;李翠 | 申请(专利权)人: | 青岛大学附属医院;赵桂秋 |
主分类号: | C07K16/14 | 分类号: | C07K16/14;C07K16/02;A61K39/395;A61P27/02;A61P31/10 |
代理公司: | 青岛联信知识产权代理事务所 37227 | 代理人: | 高洋 |
地址: | 266003 山*** | 国省代码: | 山东;37 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 特异性 曲霉 感染 卵黄 抗体 制备 应用 | ||
1.一种特异性抗烟曲霉感染的鸡卵黄抗体,其特征在于,所述的鸡卵黄抗体制备过程包括以下步骤:
步骤1:制备灭活烟曲霉菌丝悬液:接种烟曲霉菌于沙氏液体培养基中培养5天,取出烟曲霉菌丝团在研磨器中进行研磨,过滤孢子,最终将菌丝浓度调至2×109CFU/ml;
步骤2:动物免疫:将菌丝浓度2×109 CFU/mL的菌悬液与弗氏完全佐剂按1:1混合后充分乳化后,每只鸡注射1 mL/只,3周、5周、8周后换为弗氏不完全佐剂加强免疫3次;
步骤3:采用硫酸铵盐析法制备特异性抗烟曲霉感染的鸡卵黄抗体蛋白:鸡蛋打碎去掉蛋清及蛋黄膜,将蛋黄液与超纯水1:8混匀,调pH至5.1,静置过夜;离心取上清液;后根据硫酸铵的溶解度和液体体积加入可最多析出IgY蛋白的量,静置2h;再离心去掉上清液蛋白析出,加入磷酸盐缓冲液溶解蛋白,再次加入硫酸铵静置2h;离心去掉上清液留蛋白,再次加入最少可溶解蛋白的磷酸盐缓冲液量复溶蛋白,装入透析袋透析48h;将透析完毕的液体冻成固体后放入冻干机中制作成冻干粉。
2.根据权利要求1所述的特异性抗烟曲霉感染的鸡卵黄抗体,其特征在于,步骤2中所述的动物免疫注射的方法是于鸡的颈部、双翅及胸肌多处皮下散点注射,所用鸡为莱亨蛋鸡。
3.按照权利要求1所述的鸡卵黄抗体在制备防治真菌性角膜炎的药物中应用。
4.根据权利要求3所述的鸡卵黄抗体在制备防治真菌性角膜炎的药物中应用,其特征在于所述的药物制备成粉剂、药片、药膏、口腔喷雾、眼药水、眼药膏。
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