[发明专利]一种秋刀鱼脊椎骨生长特性分析模型的构建方法

权利要求书

1.一种秋刀鱼脊椎骨生长特性分析模型的构建方法，其特征在于，具体按照以下步骤实施：

步骤1、测定秋刀鱼的基础生物学参数；

步骤2、样本处理；

步骤3、测定秋刀鱼的形态学参数；

步骤4、确定秋刀鱼年龄与生长的关系方程。

2.根据权利要求1所述的秋刀鱼脊椎骨生长特性分析模型的构建方法，其特征在于，所述步骤1中测定秋刀鱼的基础生物学参数具体为：测定体长、叉长、体重、性别及性腺成熟度；体长和叉长的测定精度为0.1cm，体重测定精度为0.1g，性腺成熟度按海洋水产资源调查手册划分性腺成熟度六期标准。

3.根据权利要求2所述的秋刀鱼脊椎骨生长特性分析模型的构建方法，其特征在于，所述步骤2中样本处理具体为：

步骤2.1、去除秋刀鱼样本的内脏和肌肉；将最后一枚椎骨与颅骨的枕髁相连接处断开；最后去除头部从而取得秋刀鱼完整的脊椎骨；

步骤2.2、将脊椎骨快速拂过90℃的水，再用镊子去除脊椎骨表面肌肉；

步骤2.3、以10％的酒精处理脊椎骨，去除其表面油脂，处理时间为12h；以10％的84溶液漂白3h，其中，有效氯为5.5％-6.5％；以清水漂洗连续2次，每次0.5h，放在通风处风干；

步骤2.4、用解剖刀在脊椎骨骨节相连的结缔组织处轻轻划一下，然后用镊子将椎骨掰下，从尾基处开始，对含水量为35.9％的椎骨依次进行编号，编号顺序为从鱼尾到鱼头的方向，并放入离心管中并做好标记；

步骤2.5、配制0.02％茜素红溶液，其中，茜素红溶液含有2％的氢氧化钠，用吸管将溶液滴入到离心管中对椎骨进行染色，时间10h，然后用清水漂洗，烘干。

4.根据权利要求3所述的秋刀鱼脊椎骨生长特性分析模型的构建方法，其特征在于，所述步骤3中测定秋刀鱼的形态学参数具体为：

步骤3.1、对椎骨进行拍照时，将椎骨靠近尾部的凹面朝上，放至于OLYMPUS SZX16体式显微镜采用CCD拍照，同时在拍照过程中放置测量标尺，测量标尺的单位为μm；

步骤3.2、利用digimizer4.2.2图像分析软件对椎骨各形态参数进行测量；测量时，对标尺进行校准，然后对椎骨骨长TVL、椎骨外径R、椎骨纵轴直径D1、椎骨横轴直径D2、椎骨观察面面积S和椎骨观察面周长C6项形态参数进行测量，其中，椎骨外径R为脊椎骨核心至长轴方向边缘的距离，测量结果精度为0.001mm；

步骤3.3、根据spss软件中用主成分分析方法来确定主要形态参数，西北太平洋秋刀鱼椎骨骨长TVL与叉长FL的幂函数，

其表达式为：TVL＝0.1193(FL)^0.9666(R²＝0.824，n＝106)；

西北太平洋秋刀鱼椎骨外径R与叉长FL的最佳拟合函数为幂函数，其表达式为：R＝0.1242(FL)^1.3534(R²＝0.851，n＝106)。

5.根据权利要求4所述的秋刀鱼脊椎骨生长特性分析模型的构建方法，其特征在于，所述步骤4中确定秋刀鱼年龄与生长的关系方程具体为：

步骤4.1、年龄鉴定

年轮由两条带组成，一条宽的称为增长带，宽而透明，另一条窄的称为间歇带，窄而不透明；秋刀鱼为春秋季孵化出生，最先形成的是宽带，至秋冬季出现第一条窄带时，为半年，即为0.5龄，第二条窄带出现时为1.5龄，依次类推；

步骤4.2、计算椎骨的轮径：测量的r_n实为轮径的平面距离，要想计算年龄，首先要将该平面距离转化为轮径的实际长度R_n；将锥体的侧视图作为等腰三角形处理，利用三角形的相似原理，已知椎骨外径R和纵轴直径D1以及r_n，通过比例计算可得R_n；

通过公式来计算轮纹半径

其中，R为椎骨外径，r_n实为年轮的平面距离；

步骤4.3、计算叉长

根据样本秋刀鱼外径与叉长的回归关系拟合分析后，得出最适的关系式为幂函数，由该关系式可得到椎骨外径-叉长幂函数关系式中的回归系数b＝0.1242，结合Monastyrsky法逆算秋刀鱼的叉长，所用公式如下：

FLn=(RnR)0.1242FL]]>

其中，FLn：秋刀鱼为n龄时的逆算叉长；FL：秋刀鱼被捕获时的实测叉长；R：秋刀鱼椎骨的实测外径；Rn：秋刀鱼为n龄时的轮纹半径；

步骤4.4、生长方程

经残差平方和分析，F＝0.679、P＝0.515>0.05，西北太平洋秋刀鱼的叉长生长状况不存在性别间的显著性差异；

生长方程描述为：

Lt＝L_∞*(1-e-K*(t-T₀))       (5)

其中，L_∞为最大叉长；K为相对生长指标；T₀为理论生长起点年龄，其中，L_∞取值为31.55，K取值为0.694，T₀取值为-1.27，因此，

Lt＝31.55*(1-e-0.694*(t+1.27))        (6)。