[发明专利]一种秋刀鱼脊椎骨生长特性分析模型的构建方法

说明书

技术领域

本发明属于生物发育模型构建技术领域，具体涉及一种秋刀鱼脊椎骨生长特性分析模型的构建方法。

背景技术

秋刀鱼(cololabis saira)属颌针鱼亚目，竹刀鱼科，秋刀鱼属，主要分布于北太平洋，是日本、俄罗斯、我国大陆和台湾省等重要的远洋渔业捕捞鱼种之一，其寿命一般是两年。

鱼类年龄鉴定是渔业资源的研究基础，根据鳞片、脊椎骨和耳石等硬组织鉴定鱼类年龄是最传统和常用的方法。近年来，国内外许多学者通过脊椎骨组织来鉴别鱼类年龄，进而研究鱼类年龄结构和生长特性，有些学者根据可判读能力、吻合率和平均变异系数等方法对脊椎骨、耳石、鳞片、鳍条、鳃盖骨等硬组织进行比较分析，以确定适宜的年龄材料。对于秋刀鱼年龄研究，国内外学者利用耳石作为鉴别材料，而对秋刀鱼脊椎骨的研究仅限于椎骨数目和脊椎骨形态描述，因此利用脊椎骨组织来鉴别秋刀鱼年龄有待研究，秋刀鱼脊椎骨形态也需要进一步分析。

发明内容

本发明的目的是提供一种秋刀鱼脊椎骨生长特性分析模型的构建方法，旨在解决利用秋刀鱼椎骨分析其形态和年龄鉴定的问题。

本发明所采用的技术方案是，一种秋刀鱼脊椎骨生长特性分析模型的构建方法，具体按照以下步骤实施：

步骤1、测定秋刀鱼的基础生物学参数；

步骤2、样本处理；

步骤3、测定秋刀鱼的形态学参数；

步骤4、确定秋刀鱼年龄与生长的关系方程。

在上述技术方案中，步骤1中测定秋刀鱼的基础生物学参数具体为：测定体长、叉长、体重、性别及性腺成熟度；体长和叉长的测定精度为0.1cm，体重测定精度为0.1g，性腺成熟度按海洋水产资源调查手册划分性腺成熟度六期标准。

步骤2中样本处理具体为：

步骤2.1、去除秋刀鱼样本的内脏和肌肉；将最后一枚椎骨与颅骨的枕髁相连接处断开；最后去除头部从而取得秋刀鱼完整的脊椎骨；

步骤2.2、将脊椎骨快速拂过90℃的水，再用镊子去除脊椎骨表面肌肉；

步骤2.3、以10％的酒精处理脊椎骨，去除其表面油脂，处理时间为12h；以10％的84溶液漂白3h，其中，有效氯为5.5％-6.5％；以清水漂洗连续2次，每次0.5h，放在通风处风干；

步骤2.4、用解剖刀在脊椎骨骨节相连的结缔组织处轻轻划一下，然后用镊子将椎骨掰下，从尾基处开始，对含水量为35.9％的椎骨依次进行编号，编号顺序为从鱼尾到鱼头的方向，并放入离心管中并做好标记；

步骤2.5、配制0.02％茜素红溶液，其中，茜素红溶液含有2％的氢氧化钠，用吸管将溶液滴入到离心管中对椎骨进行染色，时间10h，然后用清水漂洗，烘干。

步骤3中测定秋刀鱼的形态学参数具体为：

步骤3.1、对椎骨进行拍照时，将椎骨靠近尾部的凹面朝上，放至于OLYMPUS SZX16体式显微镜采用CCD拍照，同时在拍照过程中放置测量标尺，测量标尺的单位为μm；

步骤3.2、利用digimizer4.2.2图像分析软件对椎骨各形态参数进行测量；测量时，对标尺进行校准，然后对椎骨骨长TVL、椎骨外径R、椎骨纵轴直径D1、椎骨横轴直径D2、椎骨观察面面积S和椎骨观察面周长C6项形态参数进行测量，其中，椎骨外径R为脊椎骨核心至长轴方向边缘的距离，测量结果精度为0.001mm；

步骤3.3、根据spss软件中用主成分分析方法来确定主要形态参数，西北太平洋秋刀鱼椎骨骨长TVL与叉长FL的幂函数，

其表达式为：TVL＝0.1193(FL)^0.9666(R²＝0.824，n＝106)；

西北太平洋秋刀鱼椎骨外径R与叉长FL的最佳拟合函数为幂函数，

其表达式为：R＝0.1242(FL)^1.3534(R²＝0.851，n＝106)。

步骤4中确定秋刀鱼年龄与生长的关系方程具体为：

步骤4.1、年龄鉴定

年轮由两条带组成，一条宽的称为增长带，宽而透明，另一条窄的称为间歇带，窄而不透明；秋刀鱼为春秋季孵化出生，最先形成的是宽带，至秋冬季出现第一条窄带时，为半年，即为0.5龄，第二条窄带出现时为1.5龄，依次类推；